GFAP标记人胎视网膜星形胶质细胞的观察.pdfVIP

维普资讯 一 2l Jll解 学杂壹 1997年第5卷第2期 GFAP标记人胎视网膜星形胶质细胞的观察 -g芷江 杨品华 唐小海* 廖 明波 ** (，l：『 科大学解剖学 成都610041 、 f 中篙。 摘要 采用胶质原纤维酸性蛋 白(GlialFibril— 再将视 网膜解剖分离 ，其免疫组化步骤简述 laryAcidicProtein，GFAP)单 克隆抗体在 人胎视 网 如下 ： ／ 膜全铺片上标记了星形胶质细胞 (Astrocyte)，观察 ①用含 1 TritonX一100的PBS液漂洗 到在视 网膜中心区(后根部)星形胶质细胞的突起束 视网膜三次，每次 lO分钟 。 与神经节细胞轴突束平行排列。它们 自视神经盘处 ②用含 1 山羊血清 PBS将免单克隆抗 向视 网膜周边部呈放射状走行 ，在 向周围行进过程 GFAP抗体稀释至 l：8O，然后用它孵育视 中突起束逐渐变稀变细，至视网膜周边部突起束 已 网膜过夜 (4℃)。 模糊不易辩认 。某些突起束还沿着残留的玻璃体动 脉延伸一段距离 ，见到的单个星形胶质细胞 ，呈纤维 ⑧将孵育后的视网膜置于含 1％Triton 性 型特征 。 X一100的PBS液中漂洗 lO分钟 。 关键词 星形胶质细胞 GFAP ④将视网膜置于稀释至 l：2o的抗免球 ● _ ● _ _ _ _ _ _ 一 ～ 一 蛋 白中室温下孵育 2小时 。 国外许多作者 已对一些动物 (鼠、猫 、免 ⑤重复第 3项漂洗 lO分钟 。 等 )的视 网膜星形 胶质细胞作 了大量 的研 ⑥在室温下孵育视网膜于稀释至 l：2O 究 【-s]，包括其形态 、分布、密度 、起源及其与 的抗生物素蛋 白，生物素过氧化物酶 (ABC) 神经节细胞轴突束和视网膜血管的关系等 混合液 中一小时。 然而对人视网膜的上述研究，目前 尚未查到 ⑦用含 l TritonX一100的 PBS液漂 为了对人类视网膜这方面进 行研 究 ，我们采 洗 2次，每次 lO分钟 ，再用 1 NiTBS漂洗 用 了免疫组化法 ，用特异性 的抗 GFAP单克 lO分钟 。 隆抗体 6『]标记星形胶质细胞 。本文着重报导 ⑧将视网膜放入 由 0．05 DAB和 l 在人胎 中视网膜星形胶质细胞突起束的分布 NiTBS含 0．01 双氧水组成 的混合液 中数 形态 。 分钟 ，之后再用 TBS液漂洗 lO分钟 。 1．材料与方法 在完成上述步骤后 ，将视 网膜展开 ，