淋巴细胞免疫表型质控品的初步研究.pdfVIP

维普资讯 临床输血与检验 2008年7月第10卷第3期 ·201 · 淋巴细胞免疫表型质控品的初步研究 吴瑜 张春涛 赵晨燕 刘春雨 王佑春 【摘要】 目的 研究液氮冻存对外周血单个核细胞(PBMCs)CD4T和CD8T百分比的影响，探索冻存 PBMCs作为 淋巴细胞免疫表型质控品的可行性。方法 收集健康成人抗凝全血，用淋巴细胞分离液分离PBMCs后液氮冻存。定期复苏 PBMCs检测CD4T和CD8T百分比，计算细胞存活率、回收率。并分析不同厂家试剂、复苏方法、固定时间等因素对CD4 T和CD8+T百分 比的影响。结果 液氮冻存O～12个月、12~24个月的PBMCsCD4T和CD8T百分 比均保持在稳定水 平 。冻存12个月PBMCsCD4T和CD8T百分比的平均变异系数 (CV)分别为14．5％和9．8％，细胞存活率为85．4 ～ 94．3 ，回收率33．3％～97．8％；冻存 12~24个月PBMCs的CD4T和CD8T百分 比的平均CV值分别为7．1 和6．5 ， 细胞存活率为88．3 ～98．5％，回收率52．3％～101％。不同复苏方法和检测试剂的结果相对稳定 ，CD4T和CD8 T百分 比的平均CV值分别为8．1 和6．4 。复苏后 的PBMCs经多聚甲醛固定可在48h内检测 。结论 液氮冻存 的PBMCs有 望作为淋 巴细胞免疫表型测定的质控品。 【关键词】 液氮冻存 外周血单个核细胞 淋巴细胞免疫表型 【中图分类号】 R446．6 【文献标识码】 A 【文章编号】 1671—2587(2008)03—0201—06 PreliminaryStudyonaPotentialPanelUsedforQualityControlofLymphocyteImmonophenotypes WU Yu．zHANG Chun—tao，ZHAOChen-yan，ela1．NationalInstitutefortheControlofPharmaceuticalandBiologicalProducts，BeOing 100050 [Abstract] Objective TostudytheeffectofliquidnitrogencryopreservationonpercentagesofCD4十T andCD8+T lymphocyte，andtoexplorethefeasibilityofcryopreservedPBM Csasaqualitycontrolpanelforlymphocyteimmonopheno— types．M ethods W holebloodspecimensfrom healthyadultswerecollectedandPBMCswereisolatedusingstandardficoll— gradientcentrifugation．Afterstoredinliquidnitrogen，thePBM Csampleswerethawedatdifferentintervalsandthenwere assessedforpercentagesofCD4 T andCD8 T lymphocyte，viabilityandrecovery．Besides，theeffectsofthawingmeth— ods，lymphocyteimmonophenotypesreagents，fixedtimeonpercentagesofCD4 T andCD8 T lymphocytewereevaluated． Results ThepercentageofCD4 T andCD8 T lymphocyteofPBMCscryopreservedinliquidnitrogenfrom 0to12mon— thesandfrom 12to 24monthesremainedstable．TheaverageCV ofCD4 T andCD8 T percentagesofPBMC cryopre— servedatdifferentintervals