免疫组化中高压消毒蒸锅处理修复抗原时间的选择.pdfVIP

维普资讯 四川解 剖学杂志 1998年 第 6卷第 4期 染 色深 ，不易与 HBsAg阳性分清 。 1． 《病理检验技术 》编写组 ：病理检验技术 。上海 ：上 4．2 地 衣 红染液 最好 在 pH1左右 ．若 在 海科学技术 出版社 1978；14O()一402。 pH2以上或两周 以上的染液都不宜使用 。 2．马祥志 ：有机化学 。中国医药科技 出版社 1996；12 34O一 344 3．Dressman G ．R．，Nayak N．C． Sachdeva R． et ／，一I 参 考 文献 al：Arn．J．MedicalSciences1985；270(1)：123． 免疫组化中高压消毒蒸锅处理 修复抗原时间的选择 (，’(， 陈丽华 吴良芳 周雪 李秀群 华西医科大学组织学研 究室 成都 610041 摘要 石蜡切片浸泡于 0．01mmol／L柠檬酸 温度 (125C)和压力 (103KPa)相 同的条 件 缓 冲液 (pH6．0)中，置高压消毒 蒸锅处理 (125C， 下 ，经 不 同时 问处 理 ，对猫 I 节段 的背 根节 103KPa)Ll～ 12min，以恢复组织 中因 甲醛 固定而被 进 行脑源性神经 营养 因子 (brain—derived 封 闭的抗原 。结 果表 明：相 同温度和压力 ，但经不 同 neurotrophicfactor，BDNF)免疫 组 化 显 色 时间处理后 ，抗原活性部位 的暴露情况不 同，免疫组 效果 的 比较研究 。 化染色 的敏感性和效果也不一致 ，提 出了高压消毒 蒸锅在处理修复抗原时 ，需摸索最佳修复时间，以期 材料和方 法 抗原活性 部位充分暴露 ，从而提高免疫组化 的敏感 性和显色效果 。 关键 词 高压消毒蒸锅 抗原修复 免疫组 ‘ 一 、 材料 化 高压消毒蒸锅为 YXOG01．280型 。抗 原 修 复 液 为 0．01mmol／I柠檬 酸缓 冲液 已有研究表 明，在应用免疫组化进 行实 (pH6．0)。取 5只正常雄性家猫 I 节段 的背 验性研 究或病理诊断时 ，将石蜡切 片经微波 根节 ，经 4 多聚 甲醛 固定 1周 ，组织常规脱 或高压锅处理进 行抗原修复后 ，可 以将福 尔 水 ，透 明后 石蜡 低 温 (60C)包 埋 ．切 片厚 马林 固定后被掩盖 的抗原暴露出来 。由 6m，等距 取片，裱于铬钒 明胶 打底 的玻 片 于高压消毒蒸锅经济方便 ，耐用及适用范 围 上 ，60C烤 2h，37C烤 2h。 广等优点，本课题组用其进行抗原修复 。但在 一 抗 ：兔抗 BDNF抗体 (编号 ：Sc一546， 抗原修复过程 中的具体方法 ，许多文献报导 ， 工作浓度 1：200)，为美 国SantaCruz公 司 在 120C，1O3KPa下 处 理 10min，可 以暴 露 产品 。 出抗原活性部位 ，能检测 出免疫 阳性反应 。是 二、方 法 否所有的组织标本均适用于此条件?本文在 切 片常规脱蜡至水 ，3 H：O 抑制 内源 25