ICU病房鲍曼不动杆菌的耐药表型和β内酰胺酶基因型检测.pdfVIP

ICU病房鲍曼不动杆菌的耐药表型 及p内酰胺酶基因型检测 曹银洁 (胜利油田中心医院，山东东营257034) 摘要：目的检测、分析Icu病房鲍曼不动杆菌耐药表型及8．内酰胺酶的基因型。方法收集Icu病房中感 染患者的痰、刨面分泌物、血、尿、胆管引流液、大便、脑脊液、胸水、腹水等标本，从中培养、分离出鲍曼不动杆菌309 株。用K—B纸片扩散法测定其对13种抗菌药物的耐药性；用Ni仃∞曲n纸片法和改良三维试验大平皿法对B一内酰 Icu病房鲍曼不动杆菌多重耐药常见，B-内酰胺酶产生率高。耐药菌的碳青霉烯酶以blaoxA-23型为主，EsBh、 Ampc酶基因的多重PCR阳性率均低。 关键词：鲍曼不动杆菌；多药耐药；B一内酰胺酶 中图分类号：R379文献标志码：B 文章编号：1002-266x(2011)30旬111也 近年来随着广谱抗生素的使用，鲍曼不动杆菌 以超声破碎法制备B一内酰胺酶粗提物，头孢硝噻吩 对临床常用抗生素的耐药性逐年增加…。2005年1显色法检测提取物。按照文献【21的方法操作，加入 月～2010年6月，本研究对309株鲍曼不动杆菌耐待测样本，放置平皿于35℃温箱过夜培养18～24 药表型和常见B一内酰胺酶基因类型进行检测。现 h，平皿上抑菌圈出现变形为阳性，反之为阴性。 报告如下。 1．4鲍曼不动杆菌菌株B一内酰胺酶基因类型的检 Pla8IlIid 1材料与方法 测分别采用Qiagen Mini妇及手工碱裂解 1．1材料309例鲍曼不动杆菌菌株分离自胜利法提取质粒。①单一引物PCR扩增法检测OxA型 油田中心医院ICu病房确诊鲍曼不动杆菌感染的 B．内酰胺酶基因O)队-23、OXA兹，方法参考文 患者痰、创面分泌物、血、尿、胆管引流液、大便、脑脊 液、胸水、腹水。使用V册K60细菌自动鉴定仪及 NFC鉴定卡鉴定菌种，标准菌株为大肠埃希菌 物设计及PCR反应步骤参考文献【4J。将所得扩增 ATCC25922和铜绿假单胞菌ATCC27853。抗菌纸产物经琼脂糖凝胶电泳观察，并用凝胶成像系统扫 片亚胺培南(IPM)、哌拉西林(PIP)、哌拉西林／他唑描成像进行分析。 2结果 巴坦(TzP)、氨苄西彬舒巴坦(AsM)、头孢他啶 (cAz)、头孢吡肟(FEP)、头孢哌酮／舒巴坦(SCF)、2．1鲍曼不动杆菌对13种抗菌药物的耐药率 阿米卡星(AK)、复方新诺明(SxT)、左旋氧氟沙星 (LEV)、氨曲南(ATM)、头孢噻肟(CTX)、头孢曲松 (CRO)。M—H培养基。 1．2鲍曼不动杆菌菌株耐药表型检测采用K—B 纸片扩散法。实验方法和判读标准均按照美国NC— C坞规定(M100—s2l-20ll版)进行。 1．3鲍曼不动杆菌菌株B一内酰胺酶类型检测采 用改良三维试验大平皿法。以Ni咖ce6n纸片鉴定 出现红色为阳性结果，1h后无颜色变化为阴性。 1 11 万方数据 将对口M中介或耐药的53株鲍曼不动杆菌的基因 42．5％、25．8％、30．4％、33．3％、46．3％、29．1％、 19．2％、25．8％、45．6％、31．1％，2008年分别为进行PCR扩增，结果发现，1l株blaOXA．23阳性， 2．7％、22．5％、27．6％、32．6％、35．4％、40．2％、 47．1％、61．2％、38．8％、22．6％、35．4％、46．6％、曼不动杆菌(33株)者，其临床资料完整的25例中 39．6％，2009年分别为3．6％、23．3％、25．3％、有23例被诊断为院内感染，说明存在对IPM耐药 23．1％、42．8％、36．1％、56．2％、77．4％、47．2％、的鲍曼不动杆菌医院感染流行，且基因型为 34．5％、42．8％、33．2％、28．9％，2010年分别为 3．2％、29．5％、35．1％、23．5％、40．2％、34．2％、可能是鲍曼不动杆菌对IPM、美罗培