小鼠脾脏自然杀伤性树突细胞纯化方法的比较.pdfVIP

·362 · Journal of Practical Oncology Vol． 27 No． 4 20 12 小鼠脾脏自然杀伤性树突细胞纯化方法的比较 1 1 1 2 1 ， ， ， ， 陈蓉明 郑秋红 龚福生 应敏刚 谢云青 (1． ， 350014 ;2 ． ， 350014) 福建省肿瘤医院肿瘤外科研究室 福建福州 福建省肿瘤医院腹部外科 福建福州 摘要: (FACS) (MACS) 目的 比较流式细胞分选技术 及免疫磁珠分选技术 对小鼠脾脏自然杀伤性树突细胞 NKDC ， 。 ， 分选纯化的效率 为自然杀伤性树突细胞的深入研究创造基本条件 方法 制备小鼠脾脏单细胞悬液 细胞 70 m ， ， ， FACS 悬液经 μ 细胞滤膜过滤 离心滤液 用红细胞裂解液裂解沉淀中的红细胞 用缓冲液洗涤两次后通过 和 MACS 分选方法各自分选其脾脏表型为NK1． 1 + CD11c + 的自然杀伤性树突细胞NKDC 。结果 分选之前小鼠脾脏 NK1． 1 + CD11c + 自然杀伤性树突细胞占3． 3% 。单细胞悬液经FACS 分选的NKDC 纯度为(90 ． 2 ± 2 ． 0 )% ，回收率 (91． 3 ± 1． 8)% ， (82 ． 5 ± 1． 2)% ; MACS (70 ． 5 ± 3． 0 )% ， (80 ． 5 ± 1． 7 )% ， 为 细胞活力 经 分选纯度为 回收率为 细胞 (60 ． 2 ± 0 ． 8)% 。 NKDC (P = 0 ． 03)， 活力为 两种方法分选 细胞纯度差异有统计学意义 回收率差异也有统计学意 (P = 0 ． 02)。 FACS MACS 、 、 。 义 结论 较 可更高效 快捷 简便地纯化小鼠脾脏自然杀伤性树突细胞 关键词:/ ; ; ; ; 脾 细胞学 树突细胞 细胞分离 免疫磁化分离 流式细胞术 中图分类号:R657 ． 6 ;Q26 文献标志码:A 文章编号:1001-1692 (2012)04-0362-04 树突状细胞(dendritic cell ，DC)与自然杀伤细 胞(natural killer cell ，NK)是免疫系统中两类特殊 1 材料与方法 ， 。DC 1． 1 的细胞 有其各自的表型特征和特定功能 既能 材料 ， NK NK1． 1-FITC 、Anti-FITC MicroBeads 、 启动适应性免疫应答 也能通过活化 细胞介导 抗鼠 单抗 ;NK DC CD11c-PE