恩诺沙星及其在鱼体内的代谢物环丙沙星残留研究.pdfVIP

2003青岛 ·全国水产养殖研讨会论文集 恩诺沙星及其在鱼体内的代谢物环丙沙星残留研究 徐维海’朱校斌’，林黎明2王新亭 (1中国科学院海津JPF究所 青岛266071) (2青岛出入境检验检疫局 青岛266002) 摘要 每天以剂量为50mg/kg的恩诺沙星 (CISH22FN303)给吉富罗非鱼投喂药饵，周期为，天， 研究恩诺沙星及其代谢产物在罗非鱼体内的分布与残留规律，确定消除半衰期。分析结果表明，恩 诺沙星在肌肉、肝脏和血液中均代谢为环丙沙星 (C17HIRFN303).在停药的同时，鱼肉、肝脏和血 液中恩诺沙星含童均达到最高，分别为3.61mg/kg.5.96mg/kg.1.25gg/mL。在停药288h后，鱼肉 中恩诺沙星含盘低于0.1mg/kg.消除半衰期为15.61h.鱼肉中代谢物环丙沙星在停药后12h才达 到最高0.223mg/kg.鱼肉中环丙沙星的残留量呈不规则变化，主要原因为环丙沙星在自身消除的 同时，思诺沙星还在不断的代谢为环丙沙星.在停药216h后，鱼冉中环丙沙星含f低于。1mg/kg. 关键词 恩诺沙星，代谢物，环丙沙星.罗非鱼 实际水产养殖中由于忽略了养殖环境恶化和药物滥用的问题，从而造成抗菌药物、农药、重金 属等在水产品体内严重积累，特别是哇诺酮类、四环素等抗菌药物的残留超标问题。己经引起世界 各国的关注。欧盟在2001年1月对我国的水产品实行全面禁运，直到6月才陆续开关，禁运期限 达6个月之多，给国家造成的损失近 10亿元.恩诺沙星和环丙沙星是哇诺酮类药物的第三代产品 (即氛哇诺酮类药物)中典型药物，能与细菌DNA回旋酶亚基A结合，从而抑制了酶的切割与连 接功能，阻止了细菌DNA的复制，从而呈抗菌作用。对链球菌和表皮葡萄球菌有抑菌和杀菌作用， 抗菌力强，体内分布广，抑菌和杀菌作用迅速、彻底，在水产养殖中应用非常广泛，特别是鱼类养 殖中.恩诺沙星在水生生物中的代谢转化规律及残留研究还尚未见报道。本文研究了恩诺沙星在罗 非鱼体内的分布、转化和残留规律，确定药物的停药期，可以指导水产养殖合理用药，确保水产品 无药物残留，对保证人体健康，扩大我国水产品出口具有重要意义。 1材料与方法 1.1 仪器和设备 Waters2695高效液相色谱仪，配有二极管阵列检测器和助温箱:均质器 (ULTRATURRAX);氮气 浓缩装置 (PIERCEMODEL1878):快速混匀器 (美国MODELM37610-26):旋转蒸发仪:高速台式离 心机 (EPPENDOF.5810R):电子分析天平(SARTORIUSR200D.精确至。.0001g);称量天平(PB602-N. 精确至。.01g):精密PH计;一次性注射器滤器:过滤膜 (0.45um.DURAPORE)等. 1.2 化学试剂与溶液 乙氰 (色谱纯):冰醋酸 (分析纯):磷酸 (分析纯):正己烷 (色谱纯，经乙氛饱和):三乙胺 (分析纯〕:无水硫酸钠 (500C灼烧4h.置于干燥器中各用);恩诺沙星、环丙沙星标准品 (SIGM人 公司.含量大于 99.9%)z恩诺沙星原粉 (河南大明实业有限公司生产，批号。浓度为 5即g/mL的恩诺沙星和环丙沙星混合标准溶液 (溶剂为乙佩，并根据实验需要稀释至一系列浓度); 1%醋酸Z.氛溶液 (1000mL的容量瓶中加入 lOmL的醋酸，乙氛定容至刻度);0.01mol/L磷酸盐/ 三乙胺缓冲液 (在 IOOOmL的容量瓶中加入0.68mL磷酸，重蒸水定容至刻度，三乙胺调节PH3.0), 1.3 实验动物与养殖条件 吉富罗非鱼购自国家级青岛罗非鱼良种场，体重200-250g，在中国科学院海洋研究所水族楼 暂养一个月，水温27-291;，充气，每日更换 1/3水体。 1.4 药物处理及取样方法 药物的配制:称取3.6g恩诺沙星原粉、1200g饵料和180g面粉混合后制成药饵。 _ 一 一 — . 2003青绳，全国水产养殖研讨会论文集 给药方式:每天按1.5%/鱼洋童投喂药饵，任其自由摄食。空白组投喂无药物饵料. 取样:对于给药组在停药 0,12,24,48,%、144,192,288,384h，取其背部肌肉、肝脏和血 液进行侧定 (每三条作为一组)。 1.5 药物的提取方法 准确称取 4g的鱼肌肉和肝脏、量取一定体积的血液分别放入