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万能的HPLC色谱柱:神话还是现实?.doc
万能的HPLC色谱柱:神话还是现实?
液相色谱过程主要依靠样品与固定相之间的相互作用。疏水作用和静电作用在液相色谱中是最普遍的两种作用力。传统的固定相只能利用其中的一种作用力进行分离。因此,如果样品性质相似并且同时洗脱,在不更换色谱柱的情况下就无法分离。
Primesep 100 色谱柱在一种混合型固定相上结合了疏水作用力和静电作用力。Primesep 100 色谱柱固定相使用了专利技术,由于嵌入了强酸官能团,使其具有亲水作用的性质,又因为键合长碳链,使其具有强疏水性(如图1)。由于键合两种不同极性的官能团,使得在一根色谱柱调整出快速分离相似样品的方法成为可能。
Primesep 100 色谱柱可以在分析有机酸、有机碱、氨基酸和中性物质时提供优异的峰形、保留时间和选择性(如同2)。
流动相可以配合质谱检测器使用(如图2、3、4、5、6、7、8、9、13)。
能够从Primesep 100 色谱柱无需在流动相中添加离子对试剂,就能保留和分离可电离的极性化合物。Primesep 100 色谱柱具有高负载力分析离子样品。多巴胺利用150×4.6mm 色谱柱进行分析,在上样量达到200μg时,也能显示出优异的峰形。
有文献证实(McCalley et al., Journal of Chromatography A,2007,1138 (1-2), 65-72,),对于离子样品,Primesep 100 色谱柱的负载能力是反相色谱柱的10倍。
图1. Primesep 100 色谱柱的键合混合型配体硅胶载体利用两种作用力分离带电样品
静电作用 疏水作用
表1. 在反相色谱条件下,最适合用Primesep 100 色谱柱分离的类型
疏水型分子 亲水型分子
强酸性 弱酸性 中性 两性离子 弱碱性 强碱性图2. 分离有机酸、有机碱、氨基酸和中性化合物时的离子交换模式和反相模式
色谱柱: Primesep 100
规格:4.6×150 mm
流速:1.0mL/min
检测器:紫外210nm
流动相:乙腈30%,三氟乙酸0.2%
流动相:乙腈70%,三氟乙酸0.05%
1.,2. ,3. ,4.吡啶,5.
图3. 用适合质谱检测器的流动相从分离氨基酸
色谱柱:Primesep 100
规格:150×4.6mm
流动相:乙腈30%,甲酸铵5mM pH3.0–25mM pH4.0 (0-10min), 甲酸铵25mM(10-15min)
流速:1.0mL/min
1. 天冬酰胺,2.
图4. 11种氨基酸的分离
组氨酸/氨基苯叔丁醇 2-吡啶甲酸、3. 异烟腙、4. 烟酸
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