DNA分子诊断技术在中药鉴定中应用.pdfVIP

陕 　西 　中 　医 　学 　院 　学 　报 　　　　　　　　　　　　　　 　　　　 30 Journal of Shaanxi College of Traditional Chinese Medicine 　Vol. 28. No. 1. 2005. 1 DNA 分子诊断技术在中药鉴定中应用 1 2 刘雯霞 　雷国莲 ( 1. 陕西中医学院研究生 ,陕西 咸阳 712046 ;2. 陕西中医学院药学系生药教研室 ,陕西 咸阳 712083) 摘 　要 :综述 DNA 分子诊断技术在中药鉴定中的应用研究 ,重点论述分子诊断技术的分类及常用 RAPD 技术 ,AFL P 技术及基因片段序列研究状况。 关键词 :生药学 ;DNA 分子诊断技术 ; 中药鉴定 ( ) 中图分类号:R282. 5 　　文献标识码 :B 　　文章编号 :1002 - 168X 2005 01 - 0030 - 03 　　 我国药材种类繁多 ,资源丰富然而来源复杂 , 品种混 DNA ( RAPD) ,任意引物 PCR (AP - PCR) ,DNA 扩增产物 淆情况严重 , 目前一直运用经典形态分类来研究药材来源, 指纹 DNA (DAF) 等 ; ③PCR - REL P 技术的结合即 AFL P 即生物物种。这种用形态分类来划分物种是建立在个体形 技术[ 4 ] 。另有根据检测DNA 的多态性的方法分两类:一类 态描述和客观观测水平上 ,得到的结论往往不完善 ,易引起 直接测序 ,DNA 序列标记法 , 目前常用的标记序列基因组 争论。当今生命科学不断取得重大突破 ,近年 PCR ( Poly 的rRNA 基因及其间隔区 IST 序列 :动物线粒体基因组中 merase Chain Reaction) 技术带来基因操作的变革 ,1990 年 12rRNA 和 cytb 基因等 ,植物叶绿体基因组的多个基因及 RAPD 由 Williams 和 Welsh 两研究小组几乎同期建立起的 其内含子、间隔区 ;一类间接方法反映序列差异 ,DNA 指纹 一项分子生物技术[ 1 ,2 ] 。自 1994 年 cheung[ 3 ] 首次将任意 标记、REL P 、SSR 、RAPD 、AFL P 、ISSP 等[ 5 ] 。亦有依据分析 引物 PCR (ArbitrarilyPrinerPCR ,AP - PCR) 技术引入中药 对象分两类 :其一 ,采用检测基因组 DNA 多态 RAPD 、AP - 鉴定学 ,几年来结合 PCR 技术鉴定中药的研究得到了极大 PCR 、AFL P ;其二 ,检测特定片段 DNA 的多态 , 即以特定的 ( ) 的发展 ,并正逐渐成为中药鉴定的一种方法。由于 DNA 分 基因 或短片段的 DNA 为研究对象 ,如 PCR - RFL P 、AS 子信息量高 ,所以 DNA 分子遗传标记鉴别中药材有其独到 PCR 的DNA 直接测序等方法[ 6 ] 。以上四种分类法是在分 的优越性。 子生物技术在中药鉴定中应用的不同阶段从不同角度进行 1. DNA 分子诊断技术分类 分类的 , 目前应用较多的主要是 RAPD 、基因片段测序 , DNA