绒毛染色体核仁形成区的观察.pdfVIP

遗兰上 些 目)I工AS(Beiiing)14(4):35-361992 绒毛染色体核仁形成区的观察 王汝斌 北（京市海淀医院内科，100080) 冯杏林 肖 展 刘权章 李 矍 哈（尔滨医科大学医学遗传研究室，150086) 应用DNA-RNA分子杂交技术，证明人 本在室温下放置3-5天。 将标本放人生理盐 类的18-28S核糖体基因 r（DNA)位于核仁 水中浸泡10分钟有（利于银染），然后用蒸馏水 形成区 N（OR)。应用银染技术可使NOR呈 冲洗干净、吹干。把标本置人潮湿平皿内用擦 特异性着色 黑（色）。此后，进一步证明银染物 镜纸覆盖，加50％AgNO33滴,1外 甲酸-2关明 质不是 ：DNA，也不是 ：RNA，而可能是核仁 胶混合液 1滴的新鲜混合液。把平皿移至表面 形成区特异的蛋白质，即和 rRNA转录相联系 温度达60-65℃水浴箱内约 1-2分钟，玻片 的酸性蛋白质，因而，银染能在细胞水平反映出 呈黄色时移去擦镜纸，然后用蒸馏水冲去残液。 xRNA 的转录活性。 银可染性取决 于 rDNA 以1:20的 Giemsa染液复染1-2分钟，气干 的有无、数量、转录活性及与染色有关的技术因 后镜检可见有转录活性的 NOR染色呈黑 色， 素141。一般认为，rDNA转录活性主要受其转 染色体臂呈褐黄色。 录速率及有转录活性的 rDNA数目的调控[510 （三）观察指标 所以，银染法是 目前探讨 rDNA功能的一个准 选择染色清晰、分散良好的完整中期分裂 确方法1］0［ 相，分析绒毛、新生儿脐带血和成人外周血细胞 银染核仁形成区 A（g-NOR）和银染近端 分裂相分别为352,284和295个。用单盲法于 着丝粒染色体联合 A（g-AA）是rDNA活性 油镜下计数 Ag-NOR均数／细胞和 D,G染 大小的指标。为了探讨绒毛细胞 rDNA活性及 色体组的 Ag-NOR均数，根据近端着丝粒染 其特点，我们用银染技术对孕早期绒毛细胞进 色体间有无银染物连接，计数 Ag-AA的频率 行了研究。 和银染近端着丝粒着色体联合的染色体 A（g- AAC）数。见图 1、图20 材 料 和 方 法 一（）材料来源 结 果 取 20例孕龄7-11周孕妇的人工流产绒 一（）Ag-NOR频率表（1) 毛，10例新生儿脐带血和 12例健康成人 （男 经统计学处理，D组Ag-NOR在绒毛与脐 性，19-20岁）外周血作分析对象。 带血之间无显著性差异 ，（一1.08,P0:01)，绒 二（）方法 毛与外周血间有极显著性差异 （，～3.66,P 将流产的绒毛孵育 10分钟，按直接法制 片。脐带血和成人外周血采用半微量全血培养 WangRubine:al.:ObservationsontheNucleo- 法 4（8小时），常规制片。银染方法参照周宏运 IttsOrganizerofMetaphase Chromosomes Activity ofAg-NORsinChorionicVillus 等[21的改良方法，并在此基础上进行了改进。标 本文于 1991年 3月 19日收到。 35 图1绒毛细胞染色休Ag-NOR(个示 Ag-NOR)