膜技术分离透明质酸发酵液可行性研究.pdfVIP

维普资讯 里 堕 兰!! l 膜技术分离透明质酸发酵液可行性研究 周海东 倪晋仁 黄 文 张建东 (北京大学环境工程系，水沙科学教育部重点实验室，北京，100871) 摘 要 研究了采用膜技术分离透 明质酸 (HA)的可行性 。试验表明，PVDF材质 的膜适合干HA发酵液的过滤 分离；以膜分离技术为主体 ，采用微滤和超滤相结合 的工艺，能够实现 HA发酵液 的分离提纯。HA浓度在一定 的范围内(微滤 ：≤1．2g ；超滤 ：≤1．5gL／)，膜工艺可稳定的运行。膜 的选择性与 TMP、剪切流速有一定的关 系；对于微滤膜 ，合适 的TMP应为0．1MPa；超滤膜为0．15MPa；试验 中最佳 的剪切流速应为 1．25m ／s。 关键词 膜技术，透 明质酸 ，发酵液 ，可行性 透明质酸 (Hyaluronicacid，HA)是 由葡萄糖醛酸 备有限公司)有效容积 5L，pH、温度 、溶解氧在线控 和乙酰氨基葡萄糖通过 81—3和 I31—4糖苷键所构成 的 制 ；温度 37℃；pH7．0～7．2；转速 200～300r／min； 重复单元而形成的线性高分子粘多糖，其分子量范围 发酵时间 30h。 为 10～10u。由于其溶液具有超强的持水性 、粘弹 1．2 膜的选择 性和生物易吸收性，在高级化妆品、医学、食品等领域 试验所用的膜如表 1所示 。需说明的是 ，试验只 均有着广泛的应用_l-31。 是对超滤膜进行 了筛选，对于微滤膜 ，采用 了和超滤 膜技术在 HA发酵液分离中虽有应用，但一般均 膜相同的材质。 是作为一种辅助分离手段 ，用于浓缩或进行小分子量 表 1 试验所用膜主要参数 物质的去除，仍需用有机溶剂进行分离 。如 Brackel4 及Ellw∞d【等 ，采用 MWCO10000，20000，30000 超滤膜渗滤去除小分子物质 。以膜技术作为一种主 体技术 ，分离 、提纯发酵液 中HA 目前 国内尚未见报 道 。 本文首先通过试验选择合适 的膜材质，而后对 HA发酵液进行错流微滤和超滤 ，研究膜技术作为主 体分离纯化技术提纯 HA的可行性。 1)a一生产厂家提供 ；b一静态法测量 ，取 3次测定 的平 均值 (仪器 型号 ：OCA200；生产厂家 ：DataphysiesInstrumentsGmbh．Filderstadt)。 1 材料和方法 膜的选择 以死端过滤方式在超滤杯 (北京 中科膜 1．1 发酵液制备 技术有限公司)中进行 。超滤杯有效容积300mL，有 菌株 ：马疫链球菌 ，试验室保存号 05—02—552。 效膜面积为 38．5cm ，操作压力为0．1MPa。通量 以 种子培养基 ：蛋 白胨 2％，酵母抽提物 1％，NaC1 30S内收集的渗透液质量换算后计算得出，渗透液质 0．2％，Na2HPO4 1‘2H2O 0．1％，KH2PO40．12％，葡 量采用 电子天平 (BS223S，Sartorius；精确度：0．001 萄糖 0．2％，pH7．0～7．2。 g)测量 。过滤溶液为 HA粗 品溶液和 HA 发酵液 ， 发酵培养基 ：蛋 白胨2％，酵母抽提物 1．3％，Na— HA粗品由北京耐确生化技术研究所提供 。 C10．2％，MgSO47‘H2O0．1％，K2HP040．15％，葡 1．3 膜错流过滤试验 萄糖 5％～7％，pH7．0～7．2。 采用平板式膜组件 ，沟道长 13cm，宽0．8cm，高 除葡萄糖在 115℃下灭菌20min外 ，其他成分均 2．5mm，水力学直径 0．95cm，有效膜面积 10．4cm 。 在 121℃灭菌 30min。将菌株在种