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生理盐水组湿敷生理盐水,治疗组湿敷中药,中药厚度2mm。每天敷药1h,连续给药7d,于末次
给药后1h,和空白对照组一起断头取血。中药治疗1天组、14天组在给药1天、14天后于末次给药后
1h断头取血。4000rpm离心10min分离血清,一20。C冷藏备用。
1.3.2离体实验每组选用8条来自不同豚鼠的气管条。根据文献制备螺旋气管条,放置于含20ml
X
平衡记录仪画出气管条的收缩曲线。调节至19外力,静止平衡气管条10rain,加入终浓度为1010—79/ml
Ach,收缩到达高峰后记录收
Ach预处理离体气管条;用K—H液冲洗后,再加入终浓度为7.5×10一一g/m1
1.4计算
以同根气管条的预防治疗后的收缩值xl相对于xo的变化来反映气管条收缩情况,采用收缩百分比
作为评价指标。
收缩百分比=垒×100%
Xo
11.0for
数据用SPSS Windows统计软件进行统计学处理,以元±s表示,各组间比较用单因素方差
分析。
2.结果
中药治疗7天组收缩百分比低于生理盐水组,P0.001,具有显著性差异;生理盐水组与空白对照
组之间不存在显著性差异。结果如表2所示。
表2中药循经敷贴含药血清抗Ach的作用(,l=8)
注:与生理盐水组比较,{+P0.001,与生理盐水组比较:4PO.05,与空白对照组比较,6P0.001
空白对照组和生理盐水组的收缩百分比低于非血清(生理盐水)组,P0.001具有显著性差异,结
果如表3显示。
表3空白血清的作用
注:与非m清组比较,料P0.001
天组之间不存在显著性差异。结果如表4。
表4中药敷贴不同用药天数含药血清抗Ach的作用(n=8)
收缩峰值(i 收缩百分比(i±s)
o) 用药后舒缩值(i1)
生理盐水组 13.75 11.34 84.26±5.12
中药治疗1天组 13.15 11.46 86.51±6.57*
中药治疗7天组 14.16 9.97 69.74±9.35$。
中药治疗14天组 13.33 8.07 67.73±5.47$}6
注:与生理盐水组比较,%。尸0.001,+P0.05,与治疗7天组比较:6P0.05
3.讨论与总结
· 80·
本实验的哮喘敷贴方是我院名老中医秦亮甫教授的经验方,其复方包含10余味中药,有效成分复
杂,作用途径多元。其作用途径既包含各中药透皮吸收进入人体后发挥的作用,也包含对经络穴位刺激
后经络腧穴发挥的作用。因此采用敷贴治疗后的动物血清进行实验可以真实全面地反映该方的疗效。但
是敷贴治疗的体内有效药物浓度低是个普遍问题。其原因有三,其一生药粉末杂质多有效成分低(不如
浓缩的丸剂,如六味地黄丸等,更不能和西医的化学制剂比);其二用药物量受限(与敷贴面积、时间
相关)单纯增加药物只是增加敷贴时生药厚度,并不增加药物吸收(不如口服用药量可以成倍增加服用
剂量);其三药物透皮吸收率低,很多成分尤其是水溶性物质很难透皮(一般认为脂溶性小分子物质透
皮吸收好。这也是和汤剂作用物质不同处)。
同时实验中的血清的添加量受限,因为离外实验一直处于通氧状态,过多的血清会产生过多的气泡,
影响实验结果;而血清中的含药浓度是有限的,不能如化学药物浓度可以直接配制。因此有效提高哮喘
模型豚鼠的血清含药浓度是本实验的关键。本实验结果表明敷贴治疗的有效成分成功进入豚鼠体内,其
血清显示出抗Ach作用。以下即本实验在血清药理学实验中的相关内容总结。
3.1实验动物的选择
包括含药血清制
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