转人CD59基因小鼠对人补体介导免疫反应保护作用.pdfVIP

维普资讯 · 430 · 郑州大学学报 (医学版 ) 2005年 5月 第 4O卷 第 3期 转人 CD59基因小 鼠对人补体介导的免疫反应 的保护作用 武玉东 △ 刘秉乾 李胜芝 李光三 1)郑州大学第一附属医院泌尿外科 郑州 450052 2)天津市泌尿外科研究所 天津 300211 3)中国科学院遗传与发育生物学 研究所 北京 100080 △男 ，38岁 ，博士 ，副教授 ，副主任医师 ，研究方向：肾移植 ；转基因动物 关键词 异种移植 ；排斥反应 ；CD59基因；小 鼠；转基因动物 中图分类号 R392．2 摘要 目的：探讨转基 因小鼠血管 内皮细胞特异性表达人 CD59(hCD59)基因对人补体介导的免疫反应的保 护作用。方法 ：通过显微注射方法建立转 hCD59基闪小鼠。采用 PCR、Southernblot方法检测 hCD59基因的整合，流 式细胞仪检测 hCD59蛋 白的表达 ，人血清体外灌注转基因小鼠心脏 、免疫组织化学染色补体 C9及 IgG评估排斥反 应的情况。结果：转基 闪小 鼠hCD59基因表达强度为人外周血 白细胞的35％ 一l20％，转基因小 鼠体外灌注心脏存 活时间明显延长(P0．01)，心脏补体 c9沉积明显减少。结论 ：血管 内皮细胞特异性表达 hCD59可以减轻异种移 植排斥反应 ，延长移植物的存活时间。 Transgenicmiceexpressingrecombinanthuman CD59 geneagainsthu— mancomplement—mediatedattack WU Yudong¨ LIU Bingqian ，L1Shengzhi ，LIGuangsan ， J)DepartmentofUrology，theFristAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450052 2) TianjinInstituteofUrologicalSurgery，Tianjin300211 3)InstituteofHeredityandDevelopmentalBiolo— gY，ChineseAcademyofScience，Beng100080 Keywords xenotransplantation；rejection；CD59gene；mice；transgenicanimal Abstract Aim：ToexploretheroleofexpressionofrecombinanthumanCD59(hCD59)geneintransgenicmiceen· dothelialcellsagainsthumancomplement·mediated attack．Methods：Transgenicmiceexpressing hCD59 weregenerated bymicroinjectionofarecombinanthCD59geneunderthecontrolthehuman1CAM-2promoter．Theoffspringweretested fortransgeneintegrationbyusingPCRandSouthernblot，andofrhCD59expressiononperipheralbloodleukocytes(PBLs) byflowcytometry．Heartsfromtransgenicmiceswereperfusedinvitrowithhumanplasma．Immunerejectionwasevaluated byimmunohistochemicalanalysisofheartsofrC9 and lgG．Results：Expression levelsofhCD59 rangedrfom 35％ to 120％ ofthaton humanPBLs．Heartsperfusedwithhumanplasmashowed longersurvivaltime，anddepos