黄芩苷对CPn感染小鼠血清TNF-α、IL-6、IL-10的调节作用.pdfVIP

黄芩苷对CPn 感染小鼠血清TNF-α、IL-6 、IL-10 的 调节作用1 1 1 1 2 1 1 刘煜德 ，吴伟 ，王嵩 ，邝枣园 ，李荣 ，黄衍寿 （指导） 1.广州中医药大学第一附属医院，广东广州（510405 ） 2.广州中医药大学，广东广州（510405 ） 摘 要： 目的：探讨肺炎衣原体感染高脂饮食小鼠后血清TNF- α、IL-6、IL-10 水平的变 化及黄芩苷的治疗作用。方法：小鼠随机分为黄芩苷高剂量组、黄芩苷低剂量组、阿奇霉素 组、模型组、正常对照组。喂饲高胆固醇饲料 1 周后，经一侧鼻腔吸入含 CPn 的培养液， 每周 1 次，共3 次。最后一次接种5 天后开始给药至实验结束，第1 次接种后第18 周处死 全部动物。结果：模型组血清TNF- α、IL-6 、IL-10 水平不同程度升高，三个治疗组三种炎 症因子水平不同程度下降。结论：CPn 感染可使高脂饮食C57BL/6J 小鼠血清TNF- α、IL-6、 IL-10 水平升高，早期给予高、低剂量黄芩苷或阿奇霉素治疗可不同程度地调节这三种炎症 因子的水平。 关键词：肺炎衣原体，黄芩苷，TNF- α，IL-6 ，IL-10 国外有学者 1978 年用禽疱疹病毒感染鸡诱导出与人类相似的动脉粥样硬化（AS ），感 染与AS 的相关性因此引起学者们的关注；1988 年，芬兰学者首先发现了肺炎衣原体(CPn) 与急性心肌梗塞、慢性冠心病相关性的血清学证据，此后感染在AS 发病中的作用日益受到 人们的重视。目前最受关注的与AS 发病可能相关的病原微生物主要有肺炎衣原体、幽门螺 杆菌、巨细胞病毒等，其中尤以肺炎衣原体研究最为广泛。鉴于炎症在感染致AS 的发病机 制中可能起重要作用，我们研究了小鼠感染 CPn 后血清相关炎症因子水平的变化，并探讨 了清热解毒中药黄芩的有效成份黄芩苷的干预作用。现将结果报告如下。 1 材料和方法 1.1 主要仪器、试剂 BIO-RAD MODEL550 酶标仪，Labsystems Dragon Wellwash 4MK2 洗板机；Mouse TNF- α试剂盒，Mouse IL-6 试剂盒，Mouse IL-10 试剂盒，均为美国RD 公司生产，批号分别 为223576 ，225941 ，22618 。 1.2 细胞株和药物 肺炎衣原体AR-39 购自美国华盛顿大学；黄芩苷由四川广汉市维康植化有限公司生产， 含量90.8% ；阿奇酶素由丽珠集团制药厂生产，批号040904 。 1.3 实验动物和饲料 雄性C57BL/6J 小鼠，8 周龄，SPF 级，由第一军医大学实验动物中心提供，许可证号： 2002-009 2003B029 2003A075,小鼠饲养于广州中医药大学第一附属医院清洁级动物房（粤监 证字 2004C0 19 号）。小鼠随机分为黄芩苷高剂量组、黄芩苷低剂量组、阿奇霉素组、模型 组、正常对照组，其中正常对照组喂普通饲料和水；黄芩苷高剂量组、黄芩苷低剂量组、阿 奇霉素组、模型组喂高胆固醇饲料，正常饮水。高胆固醇饲料含2 ％胆固醇，10％猪油，0.5 ％胆酸钠，其他各成分按标准饲料配方，由广东省实验动物中心配制。 1本课题得到国家自然科学基金（编号的资助。 -1- 1.4 CPn 感染模型的制作 黄芩苷高剂量组、黄芩苷低剂量组、阿奇霉素组、模型组喂饲高胆固醇饲料 1 周后，上 7 述各组开始接种CPn，方法如下：以乙醚麻醉小鼠后，加样枪吸取 10ul 含 0.5～1×10 IFU CPn 的培养液，经左侧鼻腔吸入。每周接种1 次，共3 次。模型组以同样方法经一侧鼻腔吸 入10ul细胞培养液。第1