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BLT2通路对LTB4所介导小鼠树突状细胞趋化功能影响
马聪1,2 韩春光2 刘永学2
1.安徽医科大学,合肥,2300002.军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北
京,100850
[摘要]目的:研究外源性LTB4对小鼠体外诱导培养的DCs趋化功能的作用,利用其受体
BLT2通路探究其作用机制。方法:体外原代培养小鼠脾来源单个核细胞,通过GM-CSF、
IL-4诱导为DCs,LPS体外刺激其成熟;流式细胞术分析DCs表面因子的表达;利用RNA
干扰技术阻断LTB4-BLT2通路;RT-PCR分析阻断BLT2DCs基因的表达;Teanswell趋化小
室装置分析LTB4-BLT2通路的阻断对外源性LTB4介导的细胞趋化的影响。结果:体外诱导
并刺激成熟的DCs高表达MHC-Ⅱ、CD11c、CD86。利用RNAi技术能够成功阻断LTB4-BLT2
通路。外源性LTB4可明显促进BLT2正常表达DCs的趋化,且与剂量成正比。阻断BLT2
通路的细胞,LTB4的趋化作用明显被抑制甚至消失。结论:DCs的LTB4-BLT2通路明显介
入DCs的趋化,深入了解其机制,有可能为研究炎症有关药物提供新靶点。
[关键词]:白三烯B4;树突状细胞;BLT2;趋化
R392.12 A
TheeffectofLTB4mediatedchemotacticfunctionviaBLT2pathwayin
mousedendriticcells
MACong1 HANChun-guang2LIUYong-xue2
1.AnhuiMedicalUniversity,Hefei230000,China
2. Institute of Radiation Medicine, Academy
ofMilitaryMedicalSciences,Beijing100850,China
Abstract:Objective:ExplorethechemotacticfunctionofexogenousLTB4onspleen-derivedDCs.
LTB4receptor2pathwaywasusedtofindthemechanismofthiseffect.Method:The
PBMC-derivedDCswereinducedinthepresenceofGM-CSF、 IL-4andLPSfrommousespleen.
FluorescenceActivatedCellSorter(FACS)wasemployedtodeterminetheexpressionofMHC
classⅡ、 CD86、 CD11c.TheBLT2siRNAwassynthesizedandtransfectedintoDCs.UsingRT-PCR
todetectedtheexpressionofBLT2geneafterblockingtheLTB4-BLT2pathwayofDCs.
ChemotaxisofBLT2-blockeddendriticcellsbyexogenousLTB4wasassessedusingthetranswell
chamber.Results:DCsexpresshighlevelofsurfacemoleculesMHC-Ⅱ、CD11c、CD86.TheBLT2
pathwaycanbeblockedsuccessfullybysiRNAtransfection.ExternalapplicationofLTB4
activatedthemigrationofnormalDCswhicheffectwasproportionaltodose,butBLT2pathway
blockedDCswasonthecontrary.Insummary,LTB4-BLT2pathwayisinvolvedinthe
chemotaxisofDCsapparently.Itmayprovidenewtargetsforthepreventionandtreatmentof
inflammatorydiseases
Keywords: LeukotrieneB4(LTB4);Dendriticcells(DCs);BLT2;chemotax
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