芍药苷对谷氨酸诱导PC12细胞损伤的保护作用及机制及研究.pdfVIP

芍药苷对谷氨酸诱导 PC12 细胞损伤的保护作用及机制研究 1* 1 1 孙 蓉 ，李晓宇 ，黄伟 (1. 山东省中医药研究院，山东 济南 250014) 目的: 观察芍药苷对MID模型大鼠保护作用与路径，明确芍药苷对MID保护机 制，为开发神经原保护剂的候选化合物奠定药理学基础。方法：借鉴体外芍药苷 对谷氨酸导致PC12 细胞神经毒作用的保护作用研究与作用机制探讨，观察细胞 形态、MTT变化、DNA断裂凝胶电泳分析、PI单染和Annexin V/PI 双染流式细胞术 分析细胞凋亡、线粒体膜电位分析、Western blot 检测蛋白的β-actin、Bcl-2 和 Bax表达，RT-PCR测定Bcl-2 基因和Bax基因在mRNA水平表达，并以此进行体内 保护作用与路径研究和体外作用靶点的探讨。结果：芍药苷通过抑制谷氨酸神经 毒作用和细胞内 Ca2+超载，改善PC12 细胞活性，并能抑制Bax表达，从而促进 Bcl-2 的表达来抑制细胞凋亡的发生，从而影响认知和记忆，是其防治多梗塞性 痴呆的重要机制。结论：芍药苷对神经细胞的保护作用明显，其保护机制与抑制 兴奋性氨基酸（EAA ）损伤和细胞内钙超载，抑制抑制Bax表达，从而促进Bcl-2 的表达来抑制细胞凋亡，蛋白表达水平与氧化应激损伤，即早基因c-fos与学习记 忆信号转导通路，来影响认知和记忆，可能为其防治多梗塞性痴呆的重要机制。 关键词 芍药苷；PC12 细胞；神经元损伤；保护作用；分子机制 Protective effect and pathway of paeoniflorin against glutamate-induced neurotoxicity in PC12 cells 1* 1 1 SUN Rong , LI Xiao-yu , Huang Wei （1.Shandong Academy of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250014 ，China ） Abstracts Objective: To observe the protective effect and pathway of paeoniflorin on multi-infarct dementis (MID) model rats, clear the protective mechanism, and lay the pharmacological basis for the development of protective neurons candidate compounds.Methods: Make the vitro paeoniflorin protective effect and mechanism 基金项目：重大新药创制专项：中药复方药理学研究及药效学评价关键技术（2009ZX09502～015 ）；国家 重点基础研究发展计划 （973 ）中医基础理论专项资助项目 （2009CB522802 ）；山东省重大新药创制综合 性大平台中药单元平台中药药理与毒理子平台建设（2009ZX09301-013 ）。 作者简介：孙 蓉，博士，研究员·博导。 通讯作者： 孙 蓉，博士，研究员·博导，从事中药药理与毒理研究。 Tel:(0531 Emai:sunrong107@163.com research on PC12 cell neuron poison induced by glutamic acid, observe the cell morphology, MTT change, DNA fracture gel electrophoresis analysis, PI single dye, cell apoptosis analyze with the Annexin V/PI double dye flow cytometry art, mitochondrial membrane potential analyze, the β-actin、Bcl-2 、Bax protein express with Western blot ，the Bcl-2 and Bax gene mRNA express with RT-PCR. Results: