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健脾益肺II号对COPD大鼠肺组织 氧化／抗氧化平衡的调节及超微结构的影响 林琳，于旭华，许银姬，吴蕾 广州中医药大学第二附属医院广东广州5101202 摘要 目的探讨健脾益肺II号调节机体氧化／抗氧化平衡的作用，从而阐明其防治COPD的 作用机理，为临床应用提供实验依据。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、健脾 益肺II号低剂量组、健脾益肺II号高剂量组、强的松组。以熏烟加气管内滴入脂多糖(LPS) 的方法建立大鼠COPD模型，给予相应药物干预，观察记录大鼠一般状况，至实验结束，应 用透射电镜对各组肺组织超微结构的变化进行观察，采用分光光度测定法测量各组动物肺组 织匀浆液中SOD活性、MDA、GSH、GSH．PX含量的变化。结果1．模型组大鼠体质量增长 较慢，比正常对照组显著降低(P0．01)，而强的松组和健脾益肺II号高剂量组、低剂量组 大鼠体质量增长较快，比模型组升高(P0．01)；2．模型组肺泡细胞外缘不完整，微绒毛稀疏， 肺泡间隔结缔组织层增厚，毛细血管外缘不完整，管壁呈分离状。与模型组相比，用药组肺 泡细胞外缘较完整，微绒毛稍多，肺泡间隔结缔组织层稍薄，毛细血管外缘较完整。3．模型 组大鼠肺组织匀浆液中的SOD活性、GSH、GSH．PX含量均比正常对照组显著降低俨0．01)， 而MDA含量则比正常对照组显著升高俨0．01)。各给药组经过药物的干预后，均能使肺组 量的变化(胗0．05)。结论健脾益肺II号方能纠正氧化／抗氧化失衡，增强抗氧化能力，保 护肺组织免于氧化损伤，这可能是健脾益肺II号方治疗COPD的作用机理之一。 关键词健脾益肺II号；COPD；氧化应激；超微结构；大鼠 obstructive disease，COPD)是呼吸系统的常见病， 慢性阻塞性肺疾病(Chronic pulmonary 表现为不完全可逆的肺通气受阻及进行性的肺功能恶化，与肺部对有害气体或有害颗粒的异 常炎症反应有关[1]。机体氧化／抗氧化失衡是造成COPD慢性损伤的重要原因，同时参与COPD 发生发展全过程。由于炎症等因素诱发了机体氧化／抗氧化失衡，将会导致病变部位过分氧 化应激，从而对组织细胞造成伤害，甚至导致气道重构【2]。健脾益肺II号方是我院的专家协 定处方，其以健脾益肺、活血化痰为原则，包括由党参、黄芪、桃仁等药物组成，在前期的 临床试验己被证明该方对COPD稳定期有良好的治疗作用，可缓解患者症状，提高生存质量 【3】。并且进一步的动物实验表明，健脾益肺II号可有效减轻COPD大鼠肺部炎症，对IL一6、IL． 8等细胞因子具有调节作用。然而，健脾益肺Ⅱ号对肺部氧化／抗氧化失衡有何影响，以及对 预防气道重构有何作用目前尚不清楚。为进一步探讨该方的作用机理，本实验采用熏烟加气 管内滴入脂多糖(LPS)的方法建立大鼠COPD模型，观察健脾益肺II号方对COPD大鼠肺组织 量的变化，同时利用透射电镜观察了其对肺组织超微结构改变的影响，为临床用药提供了理 论依据。 1材料 76 动物中心提供，动物许可证号：SCXK(粤)2008-0002。 1．2药物的配制 健脾益肺II号方：由党参、白术、锁阳等组成，(均购自康美药业、江中中药饮片有限 公司，由广州中医药大学第二临床医学院中药制剂实验室鉴定)，用回流提取法，经两次提 取药液并收集挥发油，浓缩至相当于药液含2．25g／mE生药，装入塑料瓶中，4C保存备用。 1．3实验药品与试剂 脂多糖(10mg／支，sigma公司，货号：L2880)；强的松片(广东华南药业集团有限公司， 建成科技有限公司，生产货号：A003．1、A001一l、A005、A006)。 1．4实验仪器 海欣茂仪器有限公司)；JEM--1200EX透射电镜(日本)。 1．5 COPD模型复制 大鼠在SPF级动物实验室适应性饲养3d后，采用随机法将60只大鼠分为5组，即：正 常对照组10只、模型组10只、健脾益肺II号低剂量组10只、健脾益肺II号高剂量组10 只、强的松组10只。参照宋一平等【4】的方法略加以改进制作大鼠COPD模型。正常对照组， 0．2ml(200ug)的生理盐 理盐水lml／lOOg灌胃。模型组于第1d和14d经大鼠气管内注入LPS 水溶液，气道注入当天不熏烟，第2—13d、15