基因芯片在耳鼻咽喉-头颈外科学中应用.pdfVIP

塞旦匡堂苤查!鲤!生箜!垒鲞筮鱼塑 基因芯片在耳鼻咽喉一头颈外科学中的应用 周怀恩综述孙爱华 审校 基因芯片(genechip)是20世纪90获得基因组全部转录物表达水平成为现 演着重要角色，它的变异是导致非综合 年代发展起来的一种新型实用的高新生 实，组织之间的比较可以筛选出内耳的 征耳聋发生的基因之一。 物技术。其突出特点是具有高度的并行 特异基因．通过微型解剖技术切除部分 2．2基因芯片用于药物的耳毒性研究 性、多样性、微型性和自动化，已成为高 细胞，如切除毛细胞，可以了解毛细胞的 000条基因阵列对 效、快速、大规模获取相关生物信息的重 特殊基因。在一些特定环境下，如发育过 的作用机制。用15 要手段。利用该技术可在数分钟至几小 程中、基因敲除动物及药物治疗实验过 C—k3细胞系进行研究。发现上调基因 时内完成传统分子生物学方法要数月甚 程中．内耳基因表达水平变化可以揭示 中。与花生四烯酸酯活性有关的包括磷 至数年才能完成的几万次至几十万次的 相关基因簇群的功能，协同表达可以揭 脂酶A21V和V群、磷脂酶I和Ⅲ、脂 基因分析实验。目前，基因芯片技术的应 示已知基因的相互作用．并可以发现新 肪氧化酶以及花生四烯酸5一脂肪加氧 用已非常广泛．尤其是对基因表达的检 的基因…。 酶、调整细胞呼吸的细胞色素c氧化 测．用于检测与分析基因表达情况，进而 基因芯片可用于检测对听力有重 酶、细胞色素P450单胺氧化酶，显示顺 阐明基因功能、特性及状态的基因芯片 要影响的已知基因的表达差异。Lomax铂干预后氧化作用增强，并试图通过电 称为基因表达芯片或基因表达微阵列。 等使用cDNA微阵列芯片研究大鼠蜗轴子顺磁共振和流式细胞仪来寻找超氧 自1995年Sehena等首次报道利用基因和下丘脑的mRNA表达。发现在下丘负离子和过氧化氢证据，但未成功。另 芯片对拟南芥菜的基因表达进行分析至 脑钙一ATP转换酶表达增强。该基因表外发现在应用顺铂的同时使用抗氧化 今．该技术已使我们能够获得大量不同 达不足的大鼠往往出现耳聋和平衡障 剂可以延长细胞的存活时间。 来源组织细胞的基因表达潜及由特殊的 碍。Morris等，2]制作了内耳相关微点阵活性氧产物和凋亡相关基因是庆大 刺激或治疗而导致的基因表达改变的信 芯片(CMA—IEI)，在互补DNA文库获得 霉素导致耳聋的关键因素。Nagy等[7]用 000 息。同时。微阵列技术商业化程度的不断 cDNA。制成至少含有2eDNA点阵的耳蜗底周进行培养．2／3标本放置庆大 提高更使其运用变得越来越广泛。本文 基因组表达芯片．对Corti器、侧壁和螺旋霉素中4和8h．1／3置于正常培养液 将对这一技术在耳鼻咽喉一头颈外科学 神经节进行检测，从成年CF．1鼠的内耳 中．然后对Corti器的大宗基因表达进行 的应用现状综述如下。 这三部分结构中提取总RNA，进行线性研究发现8800个基因中．有12个基因 l基因芯片的分类 扩增．阵列的大约22％一25％的基因有出现明显差异。 目前国内外正在应用的基因芯片可 高水平表达，包括一些已知功能基因和 2．3 基因芯片用于耳聋的研究Pou4f3 分为两大类。一类是cDNA微阵列芯片，假设基因。还有许多未知基因。Iijima等[3】是内耳感觉上皮中毛细胞发育的主导转 另一类是寡核苷酸微阵列芯片。前者用点 用eDNA微阵列鉴定内耳mRNA表达． 录因子，其突变DFNAl5可导致非综合 样法把cDNA片段同定在基片表面上。用显示超重大鼠内耳20条基因上调，2条征性渐进性感音神经性耳聋．用低聚核 标记的被测基因与cDNA阵列杂交，下调，上调基因包括突触融合蛋白基因． 苷酸阵列检测发现基因编码生长因子一1