基因芯片技术检测5种马病毒地研究.pdfVIP

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业生物技术学报 Journal of Agricultural Biotechnology 2006,14 (2): 203~207 ·研究论文· 基因芯片技术检测5 种马病毒* 1,2 1,2 1 2 2 2 2 2 来华 , 梁成珠 , 陆承平 **, 吴 华 , 杨元杰 , 马丰忠 , 王树峰 ,于红光 (1.南京农业大学动物医学院, 南京210095 ;山东检验检疫局, 青岛266002) : 马 摘要 通过分子克隆技术获得马疱疹病毒 1 型( 1, EHV 1)、马动脉炎病毒( , EAV) 、 流感病毒( , EIV) 、马 染性贫血病毒( , EIAV)和东部马脑脊髓炎病毒( , EEEV)等5 种病毒各一段高度保守的特异性基因片段,用芯片点样仪逐点分配到处理过的玻 片上,制备成检测芯片。提取样品中的RNA ,进行反转录和荧光标记后滴加到芯片上进行特异性杂交,对杂交结果进行扫描检 测和计算机软件分析。结果显示,制备的基因芯片可同时检测和鉴别上述5 种病毒,可检测到阳性杂交信号的最高稀释度为 -6 约 10 的病毒液, 25 个病毒DNA 拷贝,但其它病毒材料未见红色荧光信号,证明了本方法的特异性。在进 马的隔离检疫期 、马动脉炎中和抗体阳性但病毒分离阴 ,分 间,采集马鼻肺炎 性马匹的白细胞悬液 别在EHV1 和EAV 位点处可检测到阳性杂 交信号。证明基因芯片技术不但快速、准确和敏感,而且可同时进行多种病毒的检测。 : ;杂交;马疱疹病毒 马流感病毒;马 染性贫血病毒;东部马脑脊髓炎病毒 关键词 基因芯片 1 型;马动脉炎病毒; 中图分类号: S185 S188 文献标识码: A 文章编号: 1006-1304(2006)02-0203-05 Development of Diagnostic Gene Chip for Detecting Five Kinds of Virus in Horses 1,2 1,2 1 2 2 ZHU Lai-hua , LIANG Cheng-zhu , LU Cheng-ping **, WU Hua , YANG Yuan-j

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