大鼠在体血管紧张素I化酶活性检测新方法转.pdfVIP

· 836 · 中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBulletin 2003Jul；19(7)：836～8 ◇实验方法学◇ 大鼠在体血管紧张素 I转化酶活性检测新方法 李年生 胡长平 陈 修 (中南大学药学院药理学教研室，长沙 410078) 中国图书分类号 R-332；R345；R972．4；R977．3 缓激肽 (BK)的激肽酶 Ⅱ为 同一种酶 ，是调节 心血管功能 的 文献标识码 A 文章编号 1001—1978(2003)07—0836—03 重要酶之一 。其基本功能是转化血管紧张素 I(AngI)为 摘要 目的 用血管紧张素 I转化酶 (ACE)抑制药雷米普 AngⅡ及分解 BK[13。ACE活性检测多用生化方法[2。]，较 利(Ram)建立一种新 的大 鼠在体 ACE生物活性检测方法 。 为复杂 ，而用生物方法检测 ACE活性报道甚少 [4-5]。本文通 方法 比较不 同剂量 (0．05、0．1mg ·kg～ ，iv)Ram在给药 过 比较静脉注射不 同剂量雷米普利 (ramipril，Ram)后 1、24、 后 1、24、48h对血管紧张素 I(AngI)升压和缓激肽 (BK) 48hAngI升压作用和 BK 降压作用 的变化 ，间接反映ACE 降压效应的影响，以AngI的升压百分率 ( )或 BK 的降压 活性 的变化 ，建立一种敏感、可靠、简便 的在体检测 ACE活 百分率( )间接反映ACE活性变化 。结果 大 鼠给予 Ram 性 的新 方法 。 后 1、24h，静脉注射 AngI和心肌匀浆上清液(含 AngI)的 1 材料 与方法 升压作用均降低 (P(0．05)，且呈剂量依赖性 ，但在 48h后 1．1 动物和试剂 舍Wistar大 鼠(体重 200～250g)由中 Ram对 AngI和心肌匀浆上清液 (含 AngI)的升压作用无 南大学实验动物学部提供 。Ram 由德国Hoechst公司惠赠 。 影响。比较给予 Ram后 1hAngI的升压作用和缓激肽 AngI和 BK为 Sigma公司产 品。 (BK)的降压作用 ，发现 BK 的降压作用 比AngI升压作用 1．2 Ram对 AngI升压作用影响 大 鼠用戊 巴比妥钠 (30 更 明显(PO．05)。结论 大鼠静脉注射 Ram后 24h内心 mg ·kg～，ip)麻醉后 ，固定，颈总动脉插管，用生理二道仪记 肌和血浆 中ACE活性显著被抑制 ，48h后 ACE活性基本恢 录血压 。从舌下静脉 注射 AngI，以正常 平均动 脉压为 复；AngI升压、BK 降压效应 的变化可作为 ACE生物活性 100％，以AngI升压百分率( )反映ACE活性变化 。实验 的在体检测指标 ，后者更为敏感 。 共分三组 ：(1)AngI对照组 ：大 鼠累积静脉注射不 同剂量 的 AngI(O．1、0．2、0．4 g ·kg )；(2)Ram组 ：舌下静脉注射 关键词 血管紧张素 I转化酶(ACE)；雷米普利 ；缓激肽 ；血 Ram(0．05、0．1mg ·kg )后 1、24、48h再静脉注射上述 3 管紧张素 I 种剂量 AngI，比较两组 的AngI升压百分率 。 1．3 心肌匀浆上清液 的制备和心肌匀浆上清液中 ACE活 血管紧张素 I转化酶 (ACE)属二肽羧酶 (EC)，与