2014-2015学年高二生物课件：第一部分实验一《大肠杆菌的培养和分离》课件13（浙科版选修1）[ 高考].pptVIP

* * * * * * * * * * * 1为了获得纯净的培养物，其关键是防止外来杂菌的入侵污染： 1）培养皿； 2）培养基； 3）接种过程是无菌的 2请思考：培养基、培养皿、手、接种环分别如何消毒或灭菌？ 3.如何从混合的细菌中分离得到以石油为碳源的细菌？ 4.涂布分离法与划线分离法的比较课本P20 5.如何培养霉菌（属于真菌）？课本P21 课后练习1如何操作才可以尽量避免被杂菌污染？ 1)胆大心细，操作快捷； 2)注意灭菌操作原则，灭菌彻底，降低环境污染几率，手和实验服要清洁，减少操作时间，对污染源的改善要考虑周到； 3）注意微生物生长条件，如pH、渗透压、温度等。细菌喜中性偏碱性环境，喜蛋白质丰富的物质营养，喜37摄氏度的温度；而霉菌喜中性偏酸性环境，喜糖类丰富的物质营养，喜25-30摄氏度的温度。 2.在培养后如何判断是否有杂菌污染？ 1）从菌落的形态看，是否湿润、透明、黏稠，呈何种颜色等等，是区别细菌、放线菌和霉菌的关键指标； 2）用显微镜镜检观察其形态、大小，看是否有菌丝、孢子、芽孢等，这也是区别细菌、酵母、放线菌和霉菌的关键指标； 3）上述方法较难区分同类的不同物种，需要借助化学方法和进一步的形态观察，如用革兰氏染色法，观察有无鞭毛、孢子形态、孢子着生方式、芽孢、毒素及特异生理生化性质等。 课后练习3见练习第2页 课后练习4：实验完成后，接触过细菌的器皿应如何处理？ 实验完成后所有接触过细菌的器皿都必须先高压灭菌后再洗涤，特别是培养基，有可能被有害杂菌污染，在培养繁殖后，大量有害菌体影响人畜健康，也污染环境，因此必须高压灭菌。使用后的废弃物也要高压蒸汽灭菌后再抛弃。对于取样器的取样头，通常是灭菌后在超声波清洗器中加洗衣粉洗涤30min，再用清水洗净，仍可再用。 练习5：如果分离的是转基因的大肠杆菌，如何保证不被普通大肠杆菌污染？ 转基因的质粒，不是细菌中原有的质粒，而是通过改造的通常加入了抗性基因的DNA序列，如抗氨苄青霉素基因。转基因载体（质粒）转化进入大肠杆菌后，能在含有氨苄青霉素的培养中生长，而未被转化的就不能生长，其他没有抗氨苄青霉素基因的杂菌也不能生长，这种设计保证了转基因工程菌的纯洁性。在获得转基因工程菌后，如果为了选择高表达菌株进行分离，也可使用含抗生素的培养基，这就保证了转基因工程菌不能被普通（无抗性基因）的大肠杆菌污染。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 微生物的利用 大肠杆菌的分离和培养 酶的应用 果汁中的果胶和果胶酶 加酶洗衣粉的使用条件和效果 α-固定化酶的使用条件和效果 生物技术在食品加工中的应用 泡菜的腌制和亚硝酸的测定 果酒和果醋的制作 浅尝现代生物技术 植物组织培养 实验名称 涉及的生物或物质 来源 大肠杆菌的分离和培养 大肠杆菌 斜面上的菌种 果汁中的果胶和果胶酶 果胶酶 黑曲霉或苹果青霉 加酶洗衣粉的使用条件和效果 各种酶，主要是碱性蛋白酶等 微生物 α-固定化酶的使用条件和效果 α-固定化酶 枯草杆菌 果酒和果醋的制作 果酒:酵母菌+天然 果醋:醋化醋杆菌 干酵母 菌种或醋曲 泡菜的腌制和亚硝酸的测定 假丝酵母、乳酸菌 天然微生物 植物组织培养 菊花 实验1 大肠杆菌的培养和分离 实验目的： 1.进行大肠杆菌的扩增，利用液体培养基进行细菌培养的操作。 2.进行大肠杆菌的分离，用固体平面培养基本进行细菌的划线培养。 3.说明大肠杆菌培养的条件和实验原理。 （一）.微生物包括五类 病 毒 细 菌 放线菌 真 菌 原生动物 有些细菌在一定条件下，细胞质高度浓缩脱水所形成的一种抗逆性很强的球形或椭圆形的休眠体。1个细菌细胞只形成1个芽孢。 灭菌与消毒 两者要求达到的处理水平不同。消毒只要求杀灭或/和清除致病微生物，使其数量减少到不再能引起人发病。灭菌不仅要求杀灭或/和清除致病微生物，还要求将所有微生物全部杀灭或/和清除掉，包括非致病微生物 (二)培养基 1.分类(按物理形态分) (1)液体培养基 (2)固体培养基 常用的固体培养基: 琼脂固体培养基. ②微生物在固体培养基 表面生长,可以形成 肉眼可见的菌落. 2.培养基内所含的基本物质 (1)水 (2)碳源 (3)氮源 (4)无机盐 3.培养基内所需的其他条件 (1)pH值 如:培养霉菌需酸性、培养细菌需中性或微碱性 (2)特殊营养物质---- ? 如：培养乳酸杆菌需要在培养基中添加维生素 (3)氧气的含量 如:培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件 生长因子 (三)无菌技术 1、获得纯净培养物的关键: 2、无菌技术 的四个方面(参看教