2014-2015学年高二生物课件：第一部分实验二《微生物的培养和利用》课件12（浙科版选修1）[ 高考].pptVIP

一、分离以尿素为氮源的微生物 1．脲或称　尿素　，是　蛋白质　降解的产物。 2．有一些细菌含有　脲酶　，它们可以通过降解尿素作为其生长的　氮源　。 二、实验内容 本实验的内容是从土壤中分离出能利用　尿素　的细菌，观察菌落数，并了解它在　生态平衡　中的作用。以　LB全营养　培养基为对照，观察全营养生长细菌的　菌落数　。 考点1 分离以尿素为氮源的微生物 1．分离微生物的方法： 平板划线分离法 稀释平板分离法 选择培养基培养法 2．实验原理：用选择培养基可分离出以尿素为氮源的微生物，这些微生物可产生脲酶，脲酶可将尿素分解为能被植物吸收的氨，因此这类微生物具有一定的 生态学价值。可用稀释涂布平板法统计土壤样品中含有的这种微生物的数目。 3．操作步骤： ①制备无菌的LB固体培养基和尿素固体培养基 ②倒平板：倒2个LB培养基，2个尿素固体培养基 ③制备一定浓度梯度的细菌悬液 ④涂布法分离细菌 ⑤培养观察 【例1】下面是某同学做自生固氮菌分离实验的方案和观察结果： 实验目的：略 实验材料和用具：略 实验方法和步骤： (1)接种 ①接种前，准备好盛有上述 配方的培养基，放入培养皿 中并灭菌，供实验用。 ②取10 g土壤，放在无菌研钵中， 注入5 mL蒸馏水，并用无菌玻璃棒搅拌均匀，备用。 组分 含量 NaNO3 2 g KH2PO4 1 g KCl 0.5 g MgSO4 0.5 g FeSO4 0.01 g 蔗糖 30 g 琼脂 15 g 蒸馏水 1000 mL ③将接种环放在酒精灯的火焰上灭菌。将培养皿盖轻轻放在桌面上，手拿培养皿，将接种环放在培养基边缘处冷却。然后，用接种环沾取少许泥浆，轻轻地点接在培养基表面上，共点接15～20处。 ④接种后，轻轻地盖上培养皿盖，将培养皿放在实验桌上。 (2)培养 将接种的培养皿放入恒温箱内，在28～30 ℃的温度下培养3～4 d。 (3)观察 3～4 d后，取出培养皿，仔细观察培养基上稀泥浆周围出现的黏液。黏液初为无色透明，以后乳白色，最后变为褐色。表明含有自生固氮菌。 (4)镜检：略 该实验方案中有几处明显错误，请指出错误并改正(至少三处) a．错误______________________________； 应改为_______________________________； b．错误______________________________； 应改为_______________________________； c．错误____________________________； 应改为_____________________________。 【答案】a．培养基中含有NaNO3　不含N的钠盐　b．②中使用蒸馏水　无菌水　c．③中将培养皿盖放在桌面上　略微打开培养皿盖　d．④中未填写实验内容、接种人姓名和接种日期　在顶盖上写明实验内容、接种人姓名和接种日期 【变式训练1】从土壤中分离能分解尿素的细菌，可以利用选择培养基，其成分中一定有( ) ①尿素　②有机氮化合物　③无机盐　④有机碳化合物　⑤水　⑥无机碳化合物 A．①③④⑤ B．②③④⑤ C．①③④⑤ D．②③⑤⑥ A 考点2 利用指示剂颜色的变化检验酶(脲酶)所催化的反应 通过指示剂(酚红)颜色的变化检验培养基pH的变化(脲酶催化的化学反应) 【例2】不同种类的细菌菌落表现为不同的特征，下列属于菌落特征的是(　　) ①菌落大小　②菌落形状　③菌落的隆起程度　④菌落的颜色　⑤菌落的透明度 A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．①②③④⑤ D 【变式训练2】将某种细菌接种到彻底灭菌的固体培养基上，经过一段时间后能得到( ) A．无一定形态的群体 B．菌丝 C．单个细菌 D．菌落 D * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * *