2014-2015学年高二生物课件:第一部分实验二《微生物的培养和利用》课件9(浙科版选修1)[ 高考].pptVIP

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2014-2015学年高二生物课件:第一部分实验二《微生物的培养和利用》课件9(浙科版选修1)[ 高考].ppt

* * * * * * * * * * * * * 分离以尿素为氮源的微生物 实验2 (一)制备培养基: (二)制备细菌悬液 制备成10-4、10-5土壤稀释液 实验组 对照组 全营养LB固体培养基 尿素固体培养基 倒平板 需要倒2个LB平板,6个尿素平板 LB (对照) 尿素 1 2 3 平均 10-4 10-5 每个稀释度 1个LB对照平板 3个尿素平板(平行重复组) (三)涂布分离 (三)涂布分离 涂布前后玻璃刮刀需要灼烧吗? (四)恒温37℃培养24-48h,观察 LB培养基上10-4 、10-5稀释度土样涂布结果 尿素培养基上10-4 、10-5稀释度土样涂布结果 流程 制备培养基 → 灭菌 →倒平板 ↓ 称土样→梯度稀释菌液→ 涂布 →培养→观察 细菌 尿素 NH3 中性 碱性 酚红颜色: 黄色 红色 细菌产生的脲酶向周围扩散,将培养基中的尿素分解,产生的氨使培养基变碱,于是酚红由黄变红。随着培养时间的延长,红色区域的面积越来越大。 分离纯化 原理:设计特殊的分离培养基,即人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。常用选择培养基筛选。 通过观察微生物在选择培养基上生长状况或生化反应如透明圈、变色圈等进行分离。 本课题的培养基以尿素为唯一氮源。 变色圈法:在平板中加入指示剂或显色剂,使所需微生物能被快速鉴别出来。产生有机酸或胺等碱性物质的微生物,通常采用pH值指示剂可检测出来。 在本课题提供的选择培养基的配方中,尿素是培养基中的惟一氮源,因此,原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长。 实际上,微生物的培养是一个非常复杂的问题,比如有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物生长繁殖,因此能够在选择培养基上生长的微生物不一定都是所需要的微生物,还需要进一步的验证。 能够在选择培养基上生长的微生物是否都是所需要的微生物? * * * * * * * * * * * * * * * * * * *

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