氦氖激光诱变细菌细胞与原生质体选育.pdfVIP

第 34 卷第 11 期 光 　子 　学 　报 Vol . 34 No . 11 2005 年 11 月 　　　　　　　　　　　　 November 2005 A C TA P HO TON ICA SIN ICA 氦氖激光诱变细菌细胞及原生质体选育 果胶酶高产菌株 1 ,2 1 2 , 3 1 1 朱宏莉 　郭爱莲 　宋纪蓉 　杨秀芳 　张 　嘉 　张晓瑞 ( 1 西北大学生命科学学院 ,西安 7 10069) (2 西北大学化工学院 ,西安 7 10069) (3 西安理工大学机械与精密仪器工程学院 ,西安 7 10048) ( ) 摘　要 　利用氦氖激光 波长 632 . 8 nm ,功率 15 mW 诱变果胶酶产生菌的菌体细胞 ,获得了突变 株 ZHg ,其酶活达到 30 1 u ·mL - 1 ,是出发菌株的 1. 3 倍 进一步用氦氖激光照射 ZHg 的原生 质体 ,从而得到了高产突变株 ZHgA ,其酶活达到 357 u ·mL - 1 , 比 ZHg 提高了 18 % ,是出发菌 株的 1. 6 倍 该菌株在好氧和静置条件下均能良好产酶 ,经传代实验证明其产酶性能稳定 关键词 　果胶酶 ;细菌 ; HeN e 激光 ;原生质体 ;诱变 中图分类号 　　Q93 　　　　文献标识码 　　A 0 　引言 1 　材料和方法 [ 1] 1 . 1 　菌种来源 果胶酶是作用于果胶质的一类酶的总称 它 可以将存在于植物初生细胞壁和胞间层中的果胶质 菌株 ZHA 为本实验室选育菌株 分解为半乳糖醛酸等物质 ,从而破坏植物细胞壁 ,并 1 . 2 　培养基 使细胞分离 ,结构受损 利用此性质果胶酶被广泛 1. 2 . 1 　试管斜面培养基 应用于食品、造纸 、麻料脱胶 、木材防腐 、环境保护及 牛肉膏 3 g ,蛋白胨 10 g ,N aCl5 g ,琼脂 20 g , 自 饲料加工等多个领域[2～6 ] 目前 ,对于果胶酶产生 来水 1000 mL ,p H7 . 0～7 . 2 . 菌的研究以霉菌居多[7～9 ] ,对于细菌作为酶源的研 1. 2 . 2 　平板分离培养基 究和报道极少[ 10 , 11 ] . 在诱变育种方面 , 国内外大多 牛肉膏3 g ,蛋白胨 10 g ,N aCl 5 g ,N a2 H PO4 · 60 2 H O 4 . 16 g , KH PO 1. 36 g ,桔皮粉 10 g ,琼脂 采用 U V ,N T G , Co , EM S 等理化诱变剂 ,而利用 2 2 4 HeN e 激光作用于产果胶酶细菌的