基于叶绿体DNAPCR-RFLP标记东亚七筋菇分子系统发育地理学研究.pdfVIP

基于叶绿体DNA PCR-RFLP 标记的东亚七筋菇分子 系统发育地理学研究 李欣，赵桂仿* 西北大学生命科学学院，陕西西安 （710069 ） E-mail: frances_2004@126.com 摘 要：东亚七筋菇(Clintonia udensis Trautv. et Mey.)隶属于百合科七筋菇属，为多年生森 林草本植物。七筋菇属包括五个种，其中四个种分布在北美，一个种分布在东亚，是典型的 东亚－北美间断分布。东亚七筋菇被认为是该属中的原始类群，其分布区内不同的细胞型共 存(2n=14 和2n=28) ，因此，研究其居群的分子系统发育地理学对于探讨七筋菇属的多倍体 起源及系统演化有重要意义。本研究采集了 19 个居群(其中 5 个四倍体居群)进行分子系统 发育地理学研究。我们采用叶绿体DNA 分子标记探究东亚七筋菇种内的系统发育类型，研 究结果显示在所有35 种PCR-RFLP 标记/酶组合中，共检测到96 条扩增片段，其中36 条( 占 37.5 ％)具有多态性。另外，我们在所有东亚七筋菇居群中共检测到26 种单倍型，它们分属 3 个不同的分支。 研究结果表明，东亚七筋菇可能至少存在三个起源分化中心，在第四纪 气候环境的影响下，东亚七筋菇随后向东北和西南两个方向迁移扩散，最终形成了现今的分 布格局。本研究拓展了可用于该种植物分子系统学研究的遗传信息，为进一步探讨七筋菇属 植物的起源、演化提供科学依据。 关键词：东亚七筋菇，分子系统发育地理学，叶绿体DNA ，PCR-RFLP 中图分类号：Q943 1 引言 七筋菇属植物为多年生草本。全属共5 种，其中2 种(Clintonia uniflora (Schult.) Kunth 和C. andrewsiana Torr.)分布于北美西部，2 种(C. borealis (Ait.) Raf.和C. umbellulata (Michx.) Morong)分布于北美东部，东亚只有1 种(Clintonia udensis Trautv. et Mey.)，呈典型的东亚- 北美西部-北美东部间断分布。七筋菇属的染色体基数为x = 7 。其中二倍体植物仅存在于东 [1, 2] 亚，是属中比较原始的类群，四倍体植物在东亚和北美两大陆均有分布 。从细胞学角度 看，东亚七筋菇C. udensis 具有两种倍性— — 二倍体(2n ＝14)和四倍体(2n ＝28)[3] ，无论是二 倍体还是四倍体，其染色体数目均非常稳定，在同一居群内没有发现不同倍性个体的混生现 象，也没有发现非整倍体变异。Hayashil 等学者对七筋菇属植物叶绿体DNA rbcL 和 matK 两个基因的序列进行测序分析，来探讨七筋菇属不同种间的亲缘系统关系，结果表明，五个 种形成了两个单源群，东亚的七筋菇单独组成一个单源群，北美四个种组成一个单源群。在 [4] 北美单源群中又可以分为东西两支 。根据细胞学、形态学、分子生物学数据资料，东亚七 筋菇应为七筋菇属中原始的植物类型，北美其它四种七筋菇为其衍生类型。因此，东亚七筋 菇的分子系统发育地理学研究对于探讨七筋菇属的多倍体起源、分化及系统演化有重要意 义。 本文采用PCR-RFLP 技术，对19 个七筋菇居群进行了系统发育地理学研究，根据七筋 菇植物单倍型的地理分布格局推测他们可能的起源演化及迁移路线，同时，探讨东亚七筋菇 多倍体的起源及扩散。 2 材料与方法 1 本课题得到国家教育部博士点基金 （20040697010 ）以及国家自然科学基金 ）资助 - 1 - 2.1 材料 本研究所用的材料均采集于5-8 月，基本上覆盖七筋菇在中国的分布区，此外还包括日 本北海道的一个居群(详见表 1