硫酸化糖胺聚糖简易分光光度测定法.pdfVIP

第 22 卷, 第 6 期 光　谱　实　验　室 V o l. 2 2 , N o . 6 2 0 0 5 年 1 1 月 Ch inese J ou rna l of Sp ec troscop y L abora tory N ovem b er , 2 0 0 5 硫酸化糖胺聚糖的简易分光光度测定法 ① 熊双丽 　金征宇 (江南大学食品科学技术学院　江苏省无锡市江南大学食品学院糖油楼 2 10　2 14036) 摘　　要 　　利用硫酸化糖胺聚糖和阿利新蓝在酸性环境下形成可溶复合物直接比色测定硫酸化糖胺聚糖。配制 1. 1 酸性染料于 15% 磷酸2% 硫酸溶液中, 取一定量糖胺聚糖与之混合, 在 490 处比色测定。该 m g mL nm 法简单、快速, 重复性好, 勿须加热、长时间平衡和高级设备, 不受非硫酸化糖胺聚糖如透明质酸和其他大 分子阴离子如DN A 等物质的影响, 也不受其他小分子阴离子和单糖的影响, 该法可用于体液糖胺聚糖和 商品化透明质酸质量的监测。 关 键 词　硫酸化糖胺聚糖, 阿利新蓝, 分光光度法。 ( ) 中图分类号: O 657. 32　　　文献标识码: B 　　　文章编号: 2005 1　前言 糖胺聚糖为具有抗血栓、抗病毒、治疗关节炎等多种生物活性, 其产品用途广泛, 涉及药品、食 品、化妆品等, 对其含量测定和成分鉴定一般采用己糖醛酸、氨基己糖监测, 或者总糖胺聚糖与染料 ( ) 如阿利新蓝、二甲基甲基蓝 形成不溶或者可溶复合物进行比色测定。阿利新蓝是中心具有铜原子 [ 1 ] 憎水体系的四价阳离子性染料 , 本文利用强酸性条件下阿利新蓝只与硫酸化糖胺聚糖相互作用 的机理, 建立了硫酸化糖胺聚糖的简易分光光度测定法, 是一种快速、简便、准确的分析检测方法。 2　实验部分 2. 1　仪器与试剂 ( ) TU 1900 双光束紫外可见分光光度计 北京普析通用仪器有限公司 。 ( ) ( ) 阿利新蓝 8GX 北京莱博生物材料有限公司 ; 硫酸软骨素C , 透明质酸 美国Sigm a 公司 ; 肝 素; 牛血清蛋白, 生化纯; 硫酸、磷酸、硫酸钾、半胱氨酸、氯化钠、乙酸钠等均为分析纯。实验用水均 为去离子水。 染液配制: 1. 1 酸性染料溶液—— 110 阿利新蓝 8 溶于 15% 磷酸2% 硫酸中, 定 m g mL m g GX 容至 100 ; mL 硫酸软骨素钠、透明质酸钠和肝素钠标准溶液: 1 水溶液。 m g mL 3　结果与讨论 3. 1　吸收波长的确定 空白管加水 0. lmL ; 实验管分别取硫酸软骨素 (Ch S) 0、20、40、60L 、透明质酸 (HA ) 和肝素 ( ) 100 ( 1 ) , 加水至 0. 1 ,