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维普资讯
华 南 理 工 大 学 学 报 (自然 科 学 版 )
第 31卷 第 3期 JournalofSouth ChinaUniversityofTechnology Vo1．31 No．3
2003年 3月 (NaturalScienceEdition) March 2003
文章编号：1000—565X(2003)03—0045—04
纤维素酶产生菌的筛选及产酶条件
黎海彬 李 琳 黄 日波 郭祀远 蔡妙颜
(1．华南理工大学 食品与生物工程学院，广东 广州 510640；2．广西大学 生物技术实验中心 ，广西 南宁530004)
摘 要：以褐色高温单孢菌(Thermomonosporafusea)为出发茵株，通过 60S和 80S的
紫外线交替诱变孢子悬液，采用透 明圈法初筛和摇瓶培养复筛的方法，获得 了一株高产纤
维素酶的突变株 PE．211．与原始茵株相比，该突变株的产酶活力提 高了 1倍 多．文中还对
PE．211的产酶条件进行 了研究．
关键词：褐色高温单抱茵；诱变；纤维素酶
中图分类号 ：Q55；Q939．97 文献标识码 ：A
当今世界 ，化工资源的贮藏量不断减少 ，而化学 2．5g／L，调 pH值至 7．6，于 121℃下灭菌 15min．
制品和原料的需求 日益增加 ，因此 ，通过可再生纤维 (3)摇瓶产酶培养基M2(HagerdalMedium)的
素资源的生物转化生产葡萄糖和乙醇成为了一个十 组成 ：10×macrosalts100mL，50×microsalts
分重要的热门课题-lJ．纤维素酶是使纤维素降解生 20mL，酵母浸膏 1g，硫胺素 1mg，生物素 1mg，蒸
成葡萄糖的一组酶的总称 ，其最大的潜在用途是把 馏水 1000mL．其中，10×macrosalts的组成为 ：氯
纤维素类物质酶法水解成葡萄糖．迄今为止 ，已有很 化钠 1．5g，硫酸铵3．1g，磷酸氢二钠9．1g，磷酸二
多关于纤维素酶生产菌株 的研究报道 [，引，但其 中 氢钾 0．9g，蒸馏水 100mL；50×microsalts的组成
多数 以真菌如黑 曲霉 (Aspergillusniger)和木霉 为：EDTA(乙二胺四乙酸)0．05g，硫酸镁 0．2g，硫
(Trichodermaviride)等为研究对象，利用褐色高温 酸锌 0．008g，硫酸铁 0．02g，硫酸锰 0．015g，氯化
单孢茵生产纤维素酶的方法在国内还未见报道 ． 钙 0．02g，蒸馏水20mL
本研究中，笔者以一株褐色高温单孢菌 (Ther— 上述培养基中分别加入 1．0％(质量分数)的微
momonosporafusca)为出发菌株 ，通过紫外线诱变 晶纤维素作为碳源 ．
得到了一株纤维素酶高产菌株 PE一211，并对该菌株 1．2 实验方法
的产酶条件进行了研究． (1)纤维素酶(CMCase)活力测定 ：以羧甲基纤
维素钠盐作底物 。经纤维素酶水解后生成还原糖 ，然
1 材料与方法
后用 DNS(二硝基水杨酸)法测定还原糖的含量 ，由
还原糖的量来求得酶活力的大小 ．
1．1 实验材料
一 个酶活单位被定义为在 1min内转化底物产
(1)菌株 ：褐色高温单孢菌 ，由笔者所在研究室
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