转基因玉米NK603品系特异定量PCR检测方法建立.pdfVIP

生 物 技 术 通 讯 238 LETTERSINBIOTECHNOLOGY Vol.23No.2 Mar., 2012 doi: 10.3969/j.issn.1009-0002.2012.02.021 研究报告 转基因玉米NK603品系特异定量PCR检测方法的建立 a a b a a a a a a 宋君 ，雷绍荣 ，刘勇 ，尹全 ，王东 ，向冰 ，张富丽 ，刘文娟 ，常丽娟 四川省农业科学院 a. 分析测试中心；b. 植物保护研究所；四川 成都 610066 ［摘要］ 目的：建立转基因玉米NK603品系特异定量PCR检测方法，为转基因玉米NK603提供科学的定量检测依 据。方法：根据转基因玉米NK603外源基因的旁侧序列设计引物和Taqman探针，建立转基因玉米NK603品系特异 定量PCR检测方法，并采用该法检测2%含量的NK603标准品（不确定度为10%）。结果：采用构建的方法获得标准 曲线斜率为-3.6~-3.1，相关系数大于0.99，扩增效率为100.2%，在90%~110%范围内；样品检测结果（1.9%）接近已知 含量（2%，不确定度为10%）。结论：建立的转基因玉米NK603品系特异定量PCR检测方法的准确度较高，可在日常 检验中推广应用。 ［关键词］ 转基因玉米；NK603；zSS Ⅱb 基因；旁侧序列；定量检测 ［中图分类号］ Q943.2 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1009-0002（2012）02-0238-04 Establishment of Event Specific Quantitative PCR of Genetically Modified Maize （Zea mays ）Event NK603 a a b a a SONG Jun , LEI Shao-Rong *, LIU Yong , YIN Quan , WANG Dong , a a a a XIANG Bing , ZHANG Fu-Li , LIU Wen-Juan , CHANG Li-Juan a. Analysis and Test Center; b. Institute of Plant Protection; Sichuan Academy of Agricultural Sciences, Chengdu 610066, China *Corresponding author, E-mail: leishaorong2004@163.com ［Abstract ］Objective: In order to provide a basis for detection of genetically modified maize event NK603, quan⁃ titaive PCR detection method for event NK603 was studied here. Methods: Event specific quantitative PCR detec⁃ tion method of genetically modified maize event NK603 was established according to the flanking sequence of event NK603 and the sample（CRM）contained two percentage of