紫外-可见分光法定量测定谷氨酸的比较.pdfVIP

维普资讯 第 25卷 ，第 3期 光 谱 实 验 室 2008年 5月 Chinese,JournalofSpectroscopyLaboratory 紫外一可见分光法定量测定谷氨酸的比较① 陈景勇② 彭奇均 (江南大学化学与材料工程学院 江苏省无锡市蠡湖校区润园67号楼413# 214122) 摘 要 用紫外一可见分光光度法测定低浓度谷氨酸溶液：以 207rim为测定波长，谷氨酸浓度在 0．O2一O．12g／L范围内有很好的线性；以 一401rim和 一568nm为测定波长，茚三酮衍生后的谷氨酸溶液 在0．o2一o．07g／L范围内有很好的线性。此方法快速简便，结果准确，适合不同成分的产品分析与样品含 量检测。 关键词 谷氨酸，茚三酮，分光光度法。 中图分类号：0657．32 文献标识码：B 文章编号：1004·8138(2008)03—0394—04 1 前言 目前测定谷氨酸的方法主要有瓦式呼吸仪法 、氨基酸 自动分析仪法 、旋光仪法 、茚三酮 衍生法 。]、酸度滴定法 等‘。国内的味精厂大多采用瓦式呼吸仪法、氨基酸 自动分析仪法和旋光仪 法，此三种方法虽然准确度高，但其技术要求高、设备投入大，不适合一般实验操作 。酸度滴定法设 备简单，操作方便，在基层实验室应用广泛，但其终点pH值的确定存在争议，并且味精中的氨或氨 盐严重影响测定的结果。本文采用紫外一可见分光光度法测定，此方法快速简便，结果准确，适合不 同成分产品的分析与样品含量检测 ]。 ． 5 2 、 2 实验部分 N O O 2．1 仪器与试剂 仪器 ：TU一1901双光束紫外可见分光光度计 (北京普析通用仪器公司)；FA一1604电子天平(上 海精科天平仪器厂)。 试剂：谷氨酸(BR)；茚三酮(AR)；磷酸氢二钠 (AR)；氯化亚锡 (AR)等，实验用水为去离子水。 2．2 实验方法 2．2．1 谷氨酸紫外分光光度法测定 配置 0．02、0．04、0．06、0．08、0．10、0．12、0．14、0．16、0．18、0．20、0．30、0．40、0．50、0．60g／I的 谷氨酸标准溶液，置于 lcm石英比色皿中，用水作参比，在狭缝 lnm 的紫外分光光度计上，波长为 207nm条件下，测定溶液的吸光度。 ① 资金项 目：国家技术创新计划资助项 目(项 目编号：02CJ一05—05·05) ② 联系人．手机 l(OE-mail：chenjingy0ngl982@163．COrn 作者简介：陈景勇(1982一)，男，江苏省盐城市人，硕士研究生，主要从事不同分离方法的研究。 收稿 日期：2008·O1—02；接受 日期：2008—01—21 维普资讯 第 3期 陈景勇等：紫外一可见分光法定量测定谷氨酸的比较 2．2．2 谷氨酸 的茚三酮比色法测定 缓冲溶液的配制 ；配制 pH7．0的磷酸二氢钠和磷酸氢二钠缓冲溶液 。 谷氨酸标准溶液的配制：用天平准确称取 1．000g谷氨酸标准品，分别溶于 1I去离子水中。采 用逐级稀释法配得浓度为 0．O2一O．07g／I的6种标准溶液。 茚三酮试剂的配制：称取 1g茚--N和 40mg氯化亚锡 (SnCl·HzO)，溶于 50ml水中，搅拌过 滤得到 20g／I的茚三酮水溶液 。 分别吸取 0．O2一O．07g／I的标准溶液 5mL于试管中，各加入 lmI的茚三酮试剂和缓冲溶液， 共 7ml加上塞子充分摇匀。将其置于 100C水浴中加热 15min，冷却后用紫外分光光度计检测溶液 的吸光度。 3 结果与讨论 3．1 谷氨酸紫外分光光度法测定结果分析 ， 由图 1可知 ，谷氨酸溶液