hDaxx及其删除突变体在真核细胞中的表达与鉴定.pdfVIP

第 30 卷第 4 期 南华大学学报 ·医学版 2002 年 12 月 Vol . 30 No . 4 Journal of Nanhua University ( Medical Edition) Dec . 2002 　 hDaxx 及其删除突变体在真核细胞中的表达与鉴定 1 2 2 唐旭红 ,何爱桃 ,万艳平 ( 1. 湖南中医学院 西医诊断学教研室 ,湖南 长沙 410007 ;2. 南华大学 病原 生物学研究所 ,湖南 衡阳 421001) ( ) 摘 　要 : 目的 　构建N 端融合有 Gal4 DBD 的 hDaxx 及 6 种删除突变体 △hDaxx 真核细胞表达质 粒 ,并在 HT 1080 细胞中表达 。方法 　将 hDaxx 及 △hDaxx cDNA 酶切片段连接到载体pM 1 或 pM 2 相应 位点 ,构建真核细胞表达质粒 pM hDaxx 或pM △hDaxx 。用 SuperFect TM 脂转染试剂将质粒转染 HT 1080 细胞 ,细胞裂解液经 SDS - PAGE 及转硝酸纤维素膜后作 Western blot 。结果 　构建的 pM hDaxx 及 6 种 pM △hDaxx 能在 HT 1080 细胞中高度表达 hDaxx 或 △hDaxx 。结论 　N 端融合有 Gal4 DBD 的 hDaxx 及 6 种 △hDaxx 在真核细胞中成功表达 。 关键词 : hDaxx ; 　hDaxx 删除突变体 ; 　真核细胞 ; 　表达 中图分类号: Q756 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :1000 - 2510 (2002) 04 - 0325 - 03 Expression and Identification of hDaxx and Its Deletion Mutants in Eukaryotic Cells TANG Xu - hong , HE Ai - tao ,WAN Yan - ping ( Department of Diagnosis of Western Medicine , Hunan Chinese Medical College , Changsha , Hunan 410007 , China) Abstract 　Objective :To construct pMhDaxx and its 6 deletion mutants ( △hDaxx) which are fused Gal4DBD in N - terminus. hDaxx and 6 △hDaxx express in HT1080 cells. Methods : Expression plasmids of hDaxx and 6 △hDaxx in the eukaryotic cells were constructed in pM1 or pM2. And pMhDaxx or pM△hDaxx were transfected to HT1080 cells. Expression of hDaxx and △hDaxx were assayed in HT1080 cell lysate by Western blot. Results : pMhDaxx or pM△hDaxx were co