hTERT对HeLa细胞放疗后细胞周期的影响.pdfVIP

·论著· hTERT对HeLa细胞放疗后细胞周期的影响+ 奚玲，吴鹏，朱涛，王常玉，王世宣，马丁“ (华中科技大学同济医学院妇产科，武汉430030) 【摘要】 目的：研究端粒酶逆转录酶(hTERT)对HeLa细胞放疗后细胞周期的影响。 方法：将野生型端粒酶逆转录酶(WT．h’IERT)、端粒酶逆转录酶显性负突变体(DN— ELISA检测HeLa细胞端粒酶活性改变，Southera—Blot检测端粒长度改变，各转染组细胞 分别经5Gy和10Gy…Co照射，流式细胞仪检测其在照射后0、24、48和72h细胞周期分布 和凋亡的情况。结果：转染DN·hTERT后，HeLa细胞端粒酶活性下降，端粒长度显著缩 短，而转染WT—hTERT后，HeLa细胞端粒酶活性增强，端粒长度较对照组长；各转染组细 胞周期分布相似，经…Co照射24h后，各组细胞G：M峰均升高，并随照射剂量增加得更明 胞亚G1峰均升高，其中WT—hTERT组最低，而DN—hTERT组最高，对照组和DN-h7rERT组 G2M阻滞进一步增加，G1峰下降，而WT—hTERT组G2M下降，G1峰升高。结论：DN— hTERT能抑制HeLa细胞端粒酶活性，进而缩短其端粒长度，增强其对放射线的敏感性， 而Wr—hTERT通过增强G2M阻滞率促进损伤细胞修复。 【关键词】 端粒酶；人端粒酶逆转录酶；细胞凋亡；细胞周期；放射增敏 ofeffectsoftelomeraseoncell and inHeLa Study activity proliferationchemosensifivity and Obsterics Tao，eta1．Departmentof Gynecology，Tongfi舶印i— cells．X／肋曙，耽Pe增，Zhu Scienceand 430030 tal，HuazhongUniversityof Technology，Wuhan theeffectsofhumantelomerase on 【Abstract】Objective：Toinvestigate transcriptase cell inHeLaceUsafterradiation andcontrol cycle treatment．Methods：WT．hTERT．DN．}lTERT into wereusedto the were HeLacells．RT—PCRand7I’]眦P．EUSA plasmidelectroperated verify transfestion wasdeterminedsouthernblot．Thethreetransfected efficiency．Telomerelength by celllineswere to and radiation distribution growth exposed5Gy 10Gy respectively．Cellcycle examinedat after flow and rateswere and72h radition apoptosis 24h。48h by cytometery．Re- inhibitedtelomeraseac