固定化黑曲霉细胞和固定化葡萄糖异构酶生产高含量低聚果糖.pdfVIP

研究论文与综述 全国第六届工业生化学术会议(1999，福建)论文集 固定化黑曲霉细胞与固定化葡萄糖异构酶 生产高含量低聚果糖 高放摩，：．，毛赵玉秀关志龙杉-光礼 L海医药工业肼蔓：院生物制药事业部，上海200040) 范秋呈 (华东理工匕学生化工程系，JA每200237) 摘要：通常嗨法生产德聚米穗由于副产品葡萄糖的存在，使转化率不高。 本《通 过用改进的PvA一硼酸法，将磷酸化的PVA一海藻酸钠凝忮包埋黑曲霉细胞，探索r 若干固定化争件井与固定化的而茴橱异构酶协同作用， 将葡萄蟪异构化为果糖，减 0扛fl-下与40％蔗糖溶液反应3．5h，可得较高台量的低 少了底物抑制，仨50^c，pH7 聚果糖。重复厦，一‘5批，千均转化盘57％，高于单独固定化细胞反压转化率5jj以上。 关键词：固，￡化，低聚果枷，聚乙烯醇，黑曲霉， 痢萄糖异构酶 1 莳青 在世界性的保健}l品热潮中，新4翱低聚糖独树·帜，正U盏受到人们的重}见所谓低聚糖通 常是指以精昔键：博2～：0个单糖连接起束的糖类的总称。 -般来叶，这些糖的甜度比蔗糖低，物 耀化学惟I蕾与蔗糖类似， 但它们具甫 些防痫、抗病、增进健康等特殊的7#蹦功能，因此成为传 统甜咪剂有力的竞争1； 低霖果塘(Frucl¨_oligosacchandes)姚足这类功能性低聚檐t卜的一种，分f式为：G—F Fn；n=l一3(GIf葡舒棒，F为絮瓠l，j。泛右托f香蘸、蜂蜜等天然物嫒中它具有增殖 体内双歧杆茵．降血栅，簿血脂，低热箭，阢龋齿等一系列优异的4理’}功能， 显一种具彳】J很大 发展满力的酣昧剂。 工业LII聚果糖：啦常是利用微肆物(臼由或固定化1巾的芦一峡哺果赭苜=酶，11上蔗糖为底物 转化生产的． 由于』亘『蕈中副产物葡萄糖的仃在，抑制r糕物蔗糖的进 步转化，故压应液t卜低聚 果糖肯鼋不高，约有50％，且岔较多AI衙萄特和蔗糖。 为了提高转化宰，Yun，J．W．等，、“托反应叶]加人葡萄糖氧化酶，将副产物葡萄稽氧化为葡 萄糖酸，从而促使蔗糖进一步转化为眠聚果糖 也自利用葡萄：睹异构酶，将葡萄糖转化为果糖， 消豫产物抑制，得到”高肯量的低聚粜精的报导…， 聚乙烯醇(poly|、rmylMcoh01．简称PVA)是+种新型的微生物包埋同定化载体，对’E物体 有很强的亲和性，常泓F为崮佧，加入一定革的水加热融化后冷印呵得凝胶。 它具有价廉低毒， 化学稳定性好，抗微强物分解性能强等 系列优点，是一种具有实用潜力的包埋捌料， 近年来在 国内外进行r较广泛fr：研究。 卒文用改进的PVA一硼酸法包埋黑曲霉，与葡萄糖异构酶协同作用，1ii＆F通南PVA作为固 定化载伟的缺点，提粥r低聚果糖转化私，并探索r同定化及转化反应的优化条件， 174— 研究论文与综述 全国第六届工业生化学术会议I1999，福建)论文集 1材料与方法t， (略)． 2结果及讨论 2。1普通PVA～硼酸法制得的固定化细胞的重复利用性 固定化细胞／’王60C．200rpm)j／浴巾反应2．5h后测定转化率 t 5 r+ 。： j o }～ 苷_5 XlfI ＼ 倒1 器强PVA～蝴酶伍制缁嗣，芒化蜘胞酌讴《利till％ 由同1结果可≈l， 刚此可法≈．4得的旧定化细胞构t}砭刊HJj』利。卜 ：^JJ{6；J又议戈11獬籼疗： 报此0}太仟遣禽4、liJjj乐靖 60^c下强度秘低，；^力的捌夫订u『能是细胞}f|}稍造成 2．2改进的PVA一硼酸法中各种因豢对固定化细胞活力的影响 在制造同定化纲胞的过程t