白腐真菌对稻草秸秆的降解及其有关酶活性的变化_杭怡琼.pdfVIP

菌 物 系 统 20 3 403~407, 2001 Mycosystema 白腐真菌对稻草秸秆的降解及其有关酶活性的变化 杭怡琼 薛惠琴 郁怀丹 陈 谊 上海市农业科学院畜牧兽医研究所 上海 201106 摘 要:以稻草秸秆加20%棉籽壳为培养基质 接种侧耳 Z17 921 1024 菌株 在不同生长 阶段 测定培养物的主要化学成分和有关酶活的变化 结果表明 从接种到子实体形成 所 试菌株培养物的纤维素 木质素等呈持续不断的下降趋势 水份 粗蛋白含量却逐渐升高 基质中漆酶酶活性在菌丝生长初期呈迅速上升趋势 后稍降低 而愈创木酚酶活性在菌丝生 长初期及子实体形成时达到高峰 后有所降低或消失 关键词:白腐真菌 秸秆降解 木质纤维素 漆酶 愈创木酚酶 中图分类号 Q936 文献标识码 A 文章编号 100703-0403-0407 白腐真菌侧耳属(Pleurotus sp .)被发现具有自身合成并分泌多种木质素降解酶的能力 因 此深入研究白腐菌木质素降解酶活性 对开发 利用富含木质纤维素的秸秆资源具有重要意 义 木质素的分解是一个复杂的生化过程 涉及一系列酶的协同作用 不同酶的活性的高低 可能与它们在木质素分解中的作用大小和不同分解阶段中作用顺序有关 木质素的生物降解 酶主要有木素过氧化物酶 漆酶和多酚氧化酶等 尉晓宇 1990 Wood, 1998 国外该方面 的研究已有不少报道 但多集中在黄孢原毛平革菌木素过氧化物酶和锰过氧化物酶方面的研 究 Leatham(1985) 曾研究了香菇(Lentinus edodes) 的漆酶特性 国内有关研究报道较少(王 宜磊 1999) 本研究用稻草秸秆作基质接种不同白腐菌株 分析不同培养阶段其主要化学成 分和有关酶活的变化 测定白腐菌株对稻草秸秆的降解能力 以探讨其分泌的胞外酶与木质 纤维素降解的关系 1 材料与方法 1.1 材料 侧耳真菌菌株(Pleurotus sp.) Z17 921 和 1024 由上海农科院畜牧所营养室提供 稻草经 机器粉碎成 1cm 长细秸 1.2 培养方法和粗酶液制备 1.2.1 培养 稻草秸秆 5Kg 棉籽壳 1Kg 石灰0.1Kg 水 10Kg 混匀后 分装于塑料菌袋 中 每袋装湿料 300g 封口 于 121 灭菌 30min 冷却后分别接入各菌株培养物 50 g, 2% 尿素 10ml 拌匀 每个菌株各接种 14 包 2 包不接种作空白对照 25 下培养 1.2.2 粗酶液制备 对各种样品分别取样 3g 加25ml 蒸馏水 浸提4h 用四层纱布过滤后 以3500r/min 的转速离心5min 上清液即为粗酶液 在4 冰箱保存待用 参考倪新江等 1995 略改 基金项目 上海市科技兴农重点公关项目和上海市农业科学院青年科技基金资助项目 收原稿日期 2000- 12-23 收修改稿日期 2001-02-02 404 菌 物 系 统 20 卷 1.3 培养成分测定 分别对接种后7 14 21 28 35 42 49d 的菌包取样分析 取样时每个菌株取两包 揉碎 于80 烘干至恒重 测定干物质重 培养基质的粗蛋白按凯氏定氮法测定 杨胜 1993 纤维素和木质素含量参考王玉万和徐文玉 1987 方法进行测定 1.4 酶活测定 1.4.1 漆酶和愈创木酚酶活性测定 参考潘迎捷等(1991) 的方法进行 漆酶活力单位为:1u= 每毫克总蛋白在30min 内改变的光密度值 愈创木酚酶活力单位为:1u=每毫克总蛋白在30min 内改变的光密度值 1.4.2 待测样品中的蛋白定量按BCA 蛋白检测试剂盒 PIERCE 公司 方法测定 562nm 比 色 2 结果与分析 2.1 菌丝生长情况 接种后菌丝生长迅速 7d 时菌种周围菌丝生长良好 14d 后菌