湖北省监利县第一中学2015届高三生物分解尿素细菌的分离与计数导学案.docVIP

专题二 课题2 土壤中分解尿素细菌的分离与计数 【学习目标】： 1、明确培养基对微生物进行选择的原理。 2、学会统计微生物数量的方法 3、能进行实验设计与操作，并对实验结果进行分析与评价 4、热爱自然，珍爱生命，激情投入，体会微生物分离计数过程的严谨性、科学性。 【使用说明及学法指导】 1.先通读教材，理出头绪，划出重点。明确微生物分离与计数的实验流程、对照设计和培养过程中的操作技术和无菌要求。完成时间40分钟。 2.本节重难点：学会统计微生物数量的方法，能进行实验设计与操作，并对实验结果进行分析与评价。进一步形成无菌技术的意识。 预 习 案 一、尿素 尿素不能 吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成 ，才被植物利用。 土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成 。 二、筛选菌株的思路 1、自然界中目的菌株的筛选 1）依据：根据它对 的要求，到相应的环境中去寻找。 2）实例：PCR技术过程中用到的耐高温的 ，就是从 中提取出来的。 2、实验室中目的菌株的筛选 1）原理：人为提供有利于 生长的条件（包括 等），同时 或 的生长。 2方法：利用 分离。 选择培养基：在微生物学中，将允许 的微生物生长，同时 的培养基，称为选择培养基。 选择分解尿素的细菌的培养基的特点： 是唯一氮源，按物理性质归类为 培养基。 三、分离与计数 1、筛选菌株的原理 微生物的选择培养：在 中，把 作为培养基的唯一 ，原则上只有能够利用尿素的微生物才能生长。 2．统计菌落数目 方法：① 。 ② 。 理论依据：用稀释涂布平板法进行活菌计数，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的 。通过统计平板上的 ，就能推测出样品中大约含有多少个活菌。 平板计数公式： C：代表某一稀释度下平板上生长的 。 V：代表涂布平板时所用的稀释液的 。M：代表稀释 。 四、分离与计数的实验流程 土壤取样→样品稀释→取样涂布→微生物的 培养→观察并记录结果→细菌计数 1、土壤取样 1）土壤取样的原因：土壤有“ ”之称，同其它生物环境相比，土壤中的微生物，数量 ，种类 。 2）土壤要求：富含 ，PH接近 且潮湿。 3）取样部位：距地表约 的土壤层。 2、样品稀释 1）稀释原因：样品的 直接影响平板上生长的 。 2）稀释标准：选用一定稀释范围的样品液进行培养，保证获得菌落数在 之间，便于计数。 3）稀释倍数：测定土壤中细菌的数量，一般选用 倍的稀释液进行平板培养。 测定放线菌的数量，一般选用 倍稀释。 测定真菌的数量，一般选用 倍稀释。 3、微生物的培养与观察 1）培养：不同种类的微生物，往往需要不同的培养 和培养 。 2）观察：每隔 小时统计一次 数目，选取菌落数目 时的记录作为结果， 4、细菌的计数 当菌落数目稳定时，取同一 下的3个 进行计数，求出 ，并根据所对应的 计算出样品中细菌的数目。 5、对菌种的进一步鉴定 在以尿素为唯