荞麦中2种重要的功能性蛋白cDNA片段克隆与序列分析.pdfVIP

维普资讯 吉林农业大学学报 2008，30(3)：356～359 http：／／xuebao．0 ．edu．cn JournalofJilinAgriculturalUnwe~ity E-mail：jlndxb@ ．sina．com 荞麦中2种重要的功能性蛋 白cDNA片段 克隆与序列分析 胡耀辉r，郭志军 ，于寒松 ，一，刘仁杰 ，贾 帅 ，吕 蕾 (1．吉林农业大学食品科学与工程学院，长春 130118；2．吉林大学农学部植物科学学院，长 春 130062) 摘 要 ：以乌克兰甜荞为材料提取总RNA，反转录后采用 eDNA末端快速克隆技术(RACE)克隆蛋白酶抑制剂 和硫氰酸生成酶基因的3端序列，并采用生物信息学技术进行序列分析。结果表明：获得的蛋白酶抑制剂和 硫氰酸生成酶的3端基因序列片段长度分别为307hp和372bp，生物信息学分析结果表明所获得的蛋白酶抑 制剂基因片段与GenBank上已发表的苦荞蛋白酶抑制剂同源性为67％，获得的硫氰酸生成酶基因片段与Gen． Bank上 已发表的拟南芥硫氰酸生成酶的同源性为65％。 关键词：荞麦；蛋白酶抑制剂；硫氰酸生成酶；ARCE；基因克隆 中图分类号：Q785 文献标识码 ：A 文章编号：1000．5684(2008)03．0356．04 TwoKindsofImportantFunctionalProtein eDNA Cloningand SequenceAnalysisfrom Buckwheat HUYao—hui’，GUOZhi—jun’，YUHan—song’，一，LIURen—jie’，JIAShuai，山 LeI1 (1．CollegeofFoodScienceandEngineering，JilinAgriculturalUniveniq，Changchun130118，China； 2．CollegeofPlantSceince，JilinUnive~ity，Changchun130062，hCina) Abstract：Partialgenesoftwoimportantfunctionalpmtein-- pmteinaseinhibitorandrhodnaesewere cloned．T0talRNA from UkrainecoInnlonbuckwheatwasextracted．theneDNA htroughreversetranscrip— tionWas obtmned，nadthepmteinaseinhibitorna drhodnaesewere clonedbyRACE．Atlast，thepartial geneWas naalysedbyhtetechniqueofbioinformatics．The3 genesequenceofpmteinaseihn ibitorna d rhodna eseWas obtained，thelengthofthewtopartial sequencesis307bpnad372bp，respectively．The identityofpmteinaseinhibitornadrhodnaeseis67％ nad65％ betweenthepartialsequencesnadpubli— cationonGenBankbybioinformaticsanalysis． Keywords：buckwheat；pmteinaseinhibitor；rhodnaese；AR CE；genecloning 荞麦为双子叶蓼科植物，又名三角麦、乌麦。 剂 (Pmteinaseihnibitor，PI)广泛存在于动、植物和 是我国一种传统的药食两用的小宗粮食作物，其 微生物中，是一类对蛋 白酶有抑制作用的多肽或 蛋 白质具有很高的生物活性 。目前，国内外对荞 蛋 白质，能与相应蛋 白水解酶形成一定的动态平 麦蛋 白的研究主要集 中于总体功能