病毒——基因治疗中有效载体系统.pdf

维普资讯 病毒——基 因治疗 中有效 的载体系统 肖英华 李雅轩 郑继刚 (首都师范大学生物系北京100037) 摘要 基 因治疗面临的首要 问题是如何选择适 当的基 因载体将具有 治疗价值的基 因 导入靶细胞并使其有效表达 ，以达到治疗疾病 的 目的。目前基 因治疗 临床试验 中采用的载 体大多数为病毒载体 。本文主要介绍基 因治疗 中常用的4种病毒载体的生物学特性 ，以及 各 个载体在基 因治疗 中的优缺 点。 关键词 基 因治疗 病毒载体 在基 因治疗 中，病毒 已成为一种有效的载体系统 。 广泛 ，能够感染不同生物种类的多种类型细胞 ；2)能高 基 因治疗就是将外源基 因导人 目的细胞并使其有效表 效 的感染分裂细胞 ，感染率高达 100 ；3)能使外源基 达 ，从而达到治疗疾病 的 目的。作为当代医学和生物学 因完全整合到宿主细胞染色体上 。但也有 明显的不足， 的一个新 的研 究领域 的基 因治疗始 于 2O世纪 8O年 主要表现在 以下几个方面 ：1)不能感染非分裂 的细胞 ； 代 。直 到 1990年美 国成 功地 应用 基 因治疗 手段 对 2)可能产生具有复制能力的病毒 ；3)由于是随机整合 ， ADA (腺苷脱氨酶 )缺陷病进行治疗 ，才标志着基 因治 可能会 引起 “插入诱变 ”；4)包装外源 DNA 能力有限 ． 疗时代 的开始 。目前 ．基 因治疗 已从遗传病扩展到非遗 小于 8kb；5)要求靶细胞表面要具有反转录病毒 的相 传病领域 ．例如 ：传染病 ，肿瘤 ．神经系统疾病 ．免疫缺 应受体 。 陷病等 。 慢病毒载体 的研 究和应用是近几年来反转录病毒 有效的基 因治疗依赖于外源基 因在 目的细胞 中高 载体研究领域 的最新研究进展 。慢病毒属于反转录病 效 、稳定 的表达 ，而这在很大程度上取决于基 因治疗采 毒 的 1个亚类 ．包括各种灵长类病毒 (如 ，HIV一1，HIV一 用 的载体系统 。 目前基 因治疗 中所用 的载体可分为两 2一人类免疫缺陷病毒 ，SIV一猴免疫缺陷病毒 )和非灵长 大类 ：病毒载体和非病毒载体 。其 中应用最广泛 的是病 类病毒 (如 ．MVV一羊进 行性间质肺 炎病毒 ．FIV一猫免 毒载体 ．约 85 的基因治疗临床项 目采用的均是这种 疫 缺陷病毒 ，EIAV一马传染性贫血病毒)。与肿瘤反转 载体 ，因其充分利用 了病毒 高度进化所具有 的感染和 录病毒相 比．慢病毒有着复杂 的基 因组 ，因其基 因组 中 寄生特性 。从理论上讲 ．各种类型的病毒都可改成为载 存在核定位信号序列．它能够有效感染并整合 到非分 体 ．但是 由于人们对许多病毒 的生活周期 ，分子生物学 裂细胞和最终分化 的细胞 (除GO期)，例如 ：神经细胞 ， 认识不够 ，所 以现在 只有少数病毒 能够 改造成为基 因 巨噬细胞 ．肝细胞 ，心肌细胞 。这些不 同类 型 的细胞作 治疗所需要 的载体 。其 中反转录病毒 ．腺病毒 ，腺相关 为基因治疗的靶细胞在临床上具有重要价值 。慢病毒 病毒 ，单纯疱疹病毒是基 因治疗 中最 常用 的4种病毒 载体 中开发较早研究较多的是 以HIV一1为基础构建 的 载体 。 载体 。 1 反转录病毒载体 2 腺病毒载体 反转录病毒是一种 RNA病毒 ，基 因组大小在 8～ 腺病毒 为线性双链 的DNA 病毒 ，基 因组为 3O～ 1lkb之 间 。反转录病毒经寄主细胞表面 的受体蛋 白识 36kb。腺病毒与宿主细胞细胞膜上 的特异受体结合经 别后进入细胞 ，然后 在 自身基 因组编码 的反转 录酶 的 内吞作 用 进 入 细胞 ，其外 壳 在 内粒 中降解 ，其病 毒 作 用下，以基 因组 RNA 为模板反转录 出双链 DNA 双 DNA