HPLC和MALDITOF+MS联用技术分析蛋黄中的磷脂.pdfVIP

第28卷第4期 分析试验室 V01．28．No．4 Chineseof 2009—4 2009年4月 JournalArlalysisI．aboratory HPLC与MALDI—TOFMS联用技术分析蛋黄中的磷脂 李国琛1，王颜红¨，吴仁安2，王世成1 摘要：蛋黄中含有大量磷脂，其中磷脂酰胆碱(PC)和磷脂酰乙醇胺(PE)最为 丰富。本研究采用高效液相色谱法(唧C)与基质辅助激光解吸电离飞行时间 质谱(MAIDI—TOFMS)联用技术分析了蛋黄中磷脂粗提物。将从蛋黄中提取的 MS分析得 多种磷脂通过HPLC预先分离，收集各组分后分别进行MALDI—TOF 到比较清晰的质谱图。通过质谱图解析确定了蛋黄中磷脂酰胆碱、神经鞘磷脂 (SM)的脂肪酸组成。 MS 关键词：磷脂；磷脂酰胆碱；磷脂酰乙醇胺；神经鞘磷脂；I／PIE；MALDI—TOF 中图分类号：0657．63文献标识码：A 文章编号：1000-0720(2009)04-030-04 比，碎片离子少，基质与分析物形成的结晶均匀， 磷脂(phospholipids，Pk)是一类含有H3P04的 脂类，其结构中含有不同长度和饱和度的脂肪酸 以及对样品的纯度和分析物的极性要求不高u4I。 链。极性头和脂肪酸链的化学性质，以及脂肪酸 近年来开展的MALDI．TOFMS磷脂分析研究 链在磷脂分子上的分布，共同决定了某磷脂分子 主要集中于利用一个或几个磷脂标准品进行方法 探索，或者分析细胞、器官或体液的磷脂成分[15|。 的唯一结构…。随着磷脂尤其磷脂酰胆碱(phos． phatidylcholine，Pc)在食品、医药、化妆品等行业 的需求不断加大【2】，有关Pc等磷脂的研究也不断 样品中磷脂提取物分析。对于复杂磷脂提取物的 增多。蛋黄中含有丰富的磷脂，包括PC(约占磷脂 分析，MALDI—TOFMS仍存在以下问题：(1)磷脂 MS对不同种类的磷 包含多个种类，而MALDI-TOF 总量的73％)、磷脂酰乙醇胺(phosphafidyle． 脂检测灵敏度也不相同，PC等含有季胺基团的磷 thanolamine，PE)(约占15％)、及极少量的神经鞘 脂可能会抑制PE等其它类磷脂的离子信号；(2) 磷脂(sphingomyelin，sM)(约占2．5％)。欧盟曾建 议将卵磷脂(主要成分是Pc)作为婴幼儿配方加以不同种类的磷脂之间因结构相似而可能具有相同 推广‘3I。 的分子量或生成质荷比相等的离子峰，因而需要 磷脂研究以往多借助各种类型的色谱质谱联 预先分离不同种类的磷脂以防止质谱图中出现峰 的重叠。液相色谱作为MALDI．TOFMS的辅助工具 用技术【4“J，也有少数研究采用了MALDI．TOF MS【9J引。基质辅助激光解析电离分析时间质谱早已用于蛋白质和多肽的分析[17’1引。 (Matrix-ass