SSCP方法的条件优化和榨菜低盐腌制微生物多样性分析.pdfVIP

第30 卷第2 期 食 品 与生 物 技 术学 报 Vol. 30 No. 2 2011 年3 月 Journal of Food Science and Biotechnology M ar. 2011 :2011) SSCP 方法的条件优化与榨菜低盐 腌制微生物多样性分析 1, 2 * 1, 2 1, 2 1, 2 1, 2 翁佩芳 , 吴祖芳 , 龚业 , 张锐 , 沈锡权 ( 1. 宁波大学 应用海洋生物技术教育部重点实验室, 浙江 宁波315211; 2. 宁波大学 生命科学与 生物工 学院, 浙江 宁波315211) : 应用单链构象多态性( SSCP) 方 研究榨菜低盐腌制条件下的微生物群落结构与变化 研究了凝胶质量浓度电泳前处理银染操作条件对SSCP 分析方 的影响结果表明, 在凝胶质 量浓度为22 g/ dL丙烯酰胺与双丙烯酰胺质量比为29 1, 并加入体积分数6%的甘油, 4 条件 下1 T BE 缓冲液中250 V 电泳 18 h, 通过强碱性显影液和甲醛作还原剂的银染方 显色, 可以 获得理想的SSCP 图谱对榨菜低盐腌制不同时期样品的SSCP 图谱分析结果, 发现在榨菜腌制 初期优势菌群为肠膜明串珠菌( L euconostoc mesenter oid es ) , 随后转变为植物乳杆菌(L ac tobaci l lus p l antar um) 和短乳杆菌(L actobac il l us br ev is ) 占优势; 腌制后期主要存在的优势菌群为植物乳杆 菌和L act obaci ll us v ersmol dens is , 结合感官分析证实这些优势乳酸菌对保持制品高品质具有功能 作用 : 榨菜; PCRSSCP; 电泳图谱; 条件优化; 微生物多样性 : T S 255 : A Optimization of SSCP Condition and Diversity of Microbial Community in Pickled Mustard uber with Low Salinity 1, 2 * 1, 2 1, 2 1, 2 1, 2 WENG Peifang , WU Z fang , GONG Ye , ZHANG R i , SHEN Xiq an ( 1. Key Laboratory of Applied Marine Biotechnology, Ministry of Ed cation, Ningbo Universit y, Ningbo 315211, China; 2. Fac lty of Life Science and Biotechnology, Ningbo University , Ningbo 315211, China) Abstract:M icrobial comm nity and its changes in pickled m stard t ber were investigated at the low salinity by sing singlestrand conformation polymorphism ( SSCP) method. Effects of gel concentration, glycerol addition, foretreatment of electrophoresis and silver staining methods on SSCP pattern w ere also examined in this man script. The res lts