第五章培养基灭菌.pptVIP

第五章 灭菌(sterilization ) Contents Hot Tip 第一节 培养基灭菌的目的、要求和方法 Hot Tip Diagram Diagram Diagram Diagram Diagram Diagram Diagram Diagram Diagram Marketing Diagram Diagram Diagram Diagram Diagram Diagram Diagram Diagram Diagram Progress Diagram Block Diagram 3-D Pie Chart Diagram Diagram Diagram Diagram Diagram Diagram Diagram Diagram Diagram Diagram Diagram Diagram Diagram （一）维持罐 　　维持罐是一个直立的圆筒形容器，附有进出料管道。 （二）管式维持器 　　管式维持器做成蛇管状，外面用保温材料包裹。这样做的好处是克服了维持罐由于直径比进料管直径大得多，导致培养基在维持罐中不能做到先进先出，使部分料液维持时间延长，加剧培养基营养成份的破坏，或者部分料液维持时间不够，导致灭菌不彻底的弊端。 （５）降温 　　为避免培养基营养成分的破坏，保温后的培养基需要迅速降温至接近培养温度（４０～４５℃）。 　　降温所用到的设备有喷淋冷却器、板式换热器等。 （一）喷淋冷却器 　　其顶端带有齿状的水槽，冷却水从水槽内溢出沿下方的管壁以膜状依次流下，培养基从下部进入，从上部排出进入发酵罐。 （二）板式换热器 　　板式换热器由许多带有波纹的金属板叠合而成，冷却流体在相邻的间隙流动并进行热量交换。 　　它具有体积小、传热面积大、传热系数大、可拆洗的优点。 4、由热交换器组成的连续灭菌系统流程图 板式热交换器温度随时间的变化曲线 5、蒸汽直接喷射型的连续灭菌系统流程图 * LOGO 灭菌的目的、要求和方法 1 培养基的湿热灭菌 2 空气的除菌 3 无菌检测及发酵废气废物的安全处理 4 一、定义 1、培养基灭菌的定义 是指从培养基中杀灭有生活能力的所有微生物，或从中将其除去。工业规模的液体培养基灭菌，杀灭杂菌比除去杂菌更为常用。 2、灭菌（Sterilization ）与消毒（Disinfection）的区别 灭菌：用物理或化学方法杀死或除去环境中所有微生物，包括营养细胞、细菌芽孢和孢子。 消毒：用物理或化学方法杀死物料、容器、器皿内外的病源微生物。 二、培养基灭菌的目的 1、在发酵过程中夹杂其它杂菌造成的后果 生产菌和杂菌同时生长，生产菌丧失生产能力； 杂菌的生长速度有时会比生产菌生长得更快， 结果使发酵罐中以杂菌为主； 杂菌及其产生的物质，使提取精制发生困难； 杂菌会降解目的产物； 杂菌会污染最终产品，杂菌会污染最终产品； 发酵时如污染噬菌体，可使生产菌发生溶菌现象。 2、工业上具体措施包括 （1）使用的培养基和设备须经灭菌； （2）好氧培养中使用的空气应经除菌处理； （3）设备应严密，发酵罐维持正压环境； （4）培养过程中加入的物料应经过灭菌； （5）使用无污染的纯粹种子。 3、培养基灭菌的目的 杀灭培养基中的微生物，为后续发酵过程创造无菌的条件。 4、培养基灭菌的要求 （1）达到要求的无菌程度（10-3） （2）尽量减少营养成分的破坏。 5、灭菌的应用范围 （1）培养基灭菌 （2）气体除菌 （3）设备及管道的灭菌 ６、灭菌的方法 （1）化学灭菌 原理：药物与微生物细胞中的成分反应，使蛋白质变性酶失活。 常用的灭菌剂:甲醛、氯、高锰酸钾、臭氧等。 使用范围：器皿、双手和实验室、无菌室的环境灭菌， 不能用于培养基灭菌。 （２）射线灭菌 原理：利用高能量的电磁辐射与菌体核酸的光化学反应造成菌体死亡。 常用：紫外线、X射线和γ射线。 使用范围：用于室内空气及器皿表面灭菌。 （３）干热灭菌 原理：利用高温对微生物有氧化、蛋白质变性和电解质浓缩作用而杀灭微生物。 常用方法：灼烧和电热箱加热，140-180℃ 1-2小时。 使用范围：玻璃及金属用具及沙土管灭菌。 （４）湿热灭菌 原理：蒸汽冷凝放出大量潜热，具有穿透力，且在高温有水分条件下，蛋白质易变性。 常用方法：水煮常压灭菌：100℃ 　　　　　饱和蒸汽灭菌：一般121℃，30分钟 使用范围：培养基和发酵设备灭菌。 （５）过滤除菌 原理：利用微生物不能透过滤膜达到除菌的目的。 方法:使用0.01～0.45μm孔径的滤膜。 使用范围：用于压缩空气、酶溶液及其他不耐热化合物溶液除菌。 第二节 培养基的湿热灭菌 一、湿热灭菌 １、湿热灭菌的原理 　　每一种微生物都有一定的最适生长温度范