第四章 毒理学实验基础.ppt

第四章 毒理学实验基础 一、毒理学实验的原则 二、毒理学实验的目的 三、实验动物的选择和处置 四、剂量设置和对照 五、结果处理 一、毒理学实验的原则 化学物在实验动物中产生的作用可以外推于人：（1）人是最敏感的动物；（2）人和实验动物的生物学过程包括化学物的代谢，与体重或体表面积相关。 实验动物必须暴露于高剂量，这是发现对人造成潜在危害的可靠方法。 成年的健康动物和人可能的暴露途径是基本的选择。 毒理学实验的局限性--动物实验结果外推到人的不确定性 动物与人对外源化学物的反应敏感性可能不同，甚至存在质的差别； 使用少量动物、采用较大剂量，使对群体的代表性较差，可能造成高剂量与低剂量的差异； 动物数量较少，对低概率毒效应难以发现； 实验动物为纯系，成年动物，反应较单一，与接触人群的复杂性不匹配，对外源化学物的易感性存在差异。 二、毒理学实验的目的 受试物毒作用的表现和性质（描述毒理学） 在急性或慢性实验中观察动物异常，发现有害作用 剂量-反应（效应）研究 毒性评价和安全性评价的基础；得到多种毒性参数和剂量-反应（效应）线的斜率 确定毒作用的器官 阐明毒作用特点，为机制研究和毒性防治提供线索 确定损伤的可逆性 三、动物实验的职业道德 一般原则 人道主义的管理和处理 使痛觉和不适感减到最小 避免不必要的使用动物 3R 原则 replacement替代：用无知觉材料的科学方法替代有知觉脊椎动物的方法 reduction减少：保证数据信息前提下，尽量减少动物使用数量 refinement优化：必须使用动物时，减少非人道程序的影响 四、实验动物的选择 实验动物：指经人工培育，对其携带微生物实行控制，遗传背景明确，来源清楚，可用于科学研究的动物。 （一）物种选择 基本原则： 对外源化学物的毒性反应及代谢特点与人类接近的物种（很难满足）； 自然寿命不太长的物种； 易于饲养和实验操作的物种； 经济并易于获得的物种。 豚鼠：特点是毛短而光滑，生长快，抗病力强，繁殖性能好。广泛用于药物学、传染病学、免疫学、营养学、耳科学等各项医学及生物学的研究中。 C57BL/6J小鼠：黑色，对放射物质耐受性强，但照射后肝癌发生率高。眼畸形，对结核杆菌有耐受性嗜酒精性高，是肿瘤学、生理学、遗传学研究常用品系。 SD大鼠：白色，产仔多，生长发育较Wistar大鼠为快，对疾病的抵抗力尤以呼吸道疾病的抵抗力强。自发肿瘤发生率较低，对性激素感受性高。 Lewise大鼠：近交系大鼠，白化，对诱发自身免疫心肌炎高度敏感，可诱发过敏性脑脊髓炎、过敏性关节炎和自身免疫复合物血管球性肾炎等立刻移植多种肿瘤，高脂肪食物容易引起肥胖症。 BALB/c小鼠：对致癌因子敏感，对放射性照射极为敏感。生产性能良好，繁殖期长，广泛应用于肿瘤学、生理学、免疫学、核医学和单克隆抗体等研究。 BN大鼠：近交系大鼠，棕色，对实验过敏性脑脊髓炎有抗力。对自家免疫性复合性肾小球肾炎也具抗力。平均31月龄大鼠心内膜疾病的发生率为7%，先天性高血压为30%。 长爪沙鼠：被毛棕灰色，对许多需氧及厌氧菌敏感，对多种病毒、寄生虫等敏感，也常用于脑神经病、内分泌学、代谢病、肿瘤学等方面的研究。 （二）品系选择 品系：指用计划交配的方法获得的起源于共同祖先的一群动物。 同一品系的动物具有共同的遗传来源、相似的外貌特征、独特的生物学特性、稳定的遗传性能 （1）近交系动物：指采用连续20代以上兄妹交配或亲子交配而培育的纯品系动物。 基因纯合度98.6%~99.8% 适用于涉及组织或肿瘤移植的实验. 津白Ⅰ、津白Ⅱ、615、BALB/c、C3H小鼠 突变系动物：动物在生长繁殖过程中，通过自然突变或人工定向突变的方法，使其某基因发生突变并丧失原有的正常功能，该突变基因可以世代相传并保持遗传基因特性的品系动物。 无胸腺裸鼠：免疫系统缺陷可接受人类多种癌细胞移植。 免疫毒理学、化学致癌作用等研究领域 (2)杂交群动物：指两个不同近交系之间有目的地进行交配所产生的第一代动物，即杂交第一代动物。 具两系双亲所有的遗传特性，杂合程度一致，个体差异小；具备杂交优势，生命力强，无近亲衰退现象。 不能继续繁殖育种，因在子二代会发生遗传性状分离。 (3)封闭群动物：指在5年以上不从外部引进新血缘，仅由同一品系的动物在固定场所保存繁殖的动物群. 具有一定程度的遗传学差异. 昆明种小鼠、NIH小鼠、LACA小鼠、SD大鼠、青紫蓝兔、新西兰兔等均属封闭群动物. 动物品系的遗传均一性 遗传均一性排序：近交系＞杂交群＞封闭群 实验动物选择：适宜品系、固定品系 （三）实验动物微生物控制的