采用毛细管电泳法测定啤酒和麦芽汁中的氨基酸.doc

采用毛细管电泳法测定啤酒和麦芽汁中的氨基酸 介 绍 啤酒中的氨基酸大部分源自麦芽。以下该法能够快速定量测定啤酒和麦芽汁中的游离氨基酸：精氨酸，赖 氨酸，酪氨酸，苯丙氨酸，组氨酸，亮氨酸和异亮氨酸（总量） ，蛋氨酸，缬氨酸，脯氨酸，丙氨酸，甘氨酸， 半胱氨酸，色氨酸，天门冬氨酸和谷氨酸含量。由于在样品分解天冬酰胺谷氨酰胺成水解天门冬氨酸和谷氨酸 含量。分别地这两个酸的含量代表总含量该酸和酰胺。 测量方法 游离的氨基酸转化为苯基硫代氨基甲酸(PTC衍生物)。是通过苯基异硫氰酸酯和他们的离子形式在电场作 用下，在石英毛细管中进行分离。PTC 衍生物的检测通过在缓冲溶液中测量在 254 nm 处的吸收。 氨基酸浓度范围 啤酒样品中分析氨基酸的浓度范围列于表中 毛细管电泳的优点 ● 十水合四硼酸钠 与啤酒样品的氨基酸分析仪相比，毛细管电泳 ● 乙醇，精馏 有几个优点： ● 磷酸二氢钠（一水或二水） ● 低分析成本 ● 2- 丙醇 ● 无需昂贵的色谱柱 ● L- 氨基酸 ● 分析时间短 ● 二十水合氢氧化钡 设备与试剂 ● 苯基异硫氰酸(PITC) ● 十水合磷酸氢二钠 以下设备和试剂在测量中被使用： ● β - 环糊精（β -CD） ● CAPEL-105/105M毛细管电泳仪携特殊的毛细管 ● 硫酸 盒作为氨基酸分析 ● 去离子蒸馏水 所有的试剂必需是分析纯或更高规格。 ● 盐酸，水中浓度 37wt.% 在 WINDOWS? 98/ME/NT/2000/XP 系统下安装 ● 氢氧化钠 采集和处理色谱数据的ChromSpec? 软件包可实现 ● 甲酸 对数据的采集、收集、处理和输出。 前处理步骤 前处理步骤包括：取样和样品准备，毛细管调试，辅助和校准溶液的准备，CAPEL? 毛细管电泳仪的校正。 测量步骤 取样: 取样需按照标准认证协议。 毛细管调试依次用 1M 盐酸，蒸馏水、1M 氢氧化钠，蒸馏 水，背景电解质冲洗。 数据处理 ChromSpec? 软件完成色氨酸浓度数据的分析，整合和计算。 实例分析 样 品： 啤酒“X”(100 μ l) 缓冲剂：β CD 磷酸盐 毛细管：LEFF/LTOTAL 65/75 cm，ID 50 μ m 注射量：水压注射(5 秒 3000Pa) 电 压： 25kV 测 量： 254 nm 其他啤酒组件，它们可以由毛细管电 泳方法如下： ● 无机阴离子水在啤酒酿造过程中 ● 无机阳离子水在啤酒酿造过程中 ● 有机酸（甲酸，乙酸，和其他酸） ● 酒花和啤酒的苦酸 ● 维他命（B 组，抗坏血酸） ● 胺（组胺，挥发性烷基胺） ● 在成品防腐剂及颜色添加剂