汉族人群脂联素基因多态性和缺血性脑卒中关联研究.pdfVIP

第三届晋冀鲁豫流行病学学术会议暨2010流行病学郑州论坛 汉族人群脂联素基因多态性与缺血性脑卒中关联研究 陈小良1’2程锦泉1’2潘静静1申明慧1杨黎明1张艳彪1胡东生1 (1郑州大学流行病学教研室2深圳市疾病预防控制中心) 摘要目的：探索脂联素基因多态性与汉族人群缺血性脑卒中的关联，为缺血性脑卒中的预防与控制 提供线索和依据。方法：本研究采用1：1配对的病例对照研究方案，收集缺血性脑卒中新发病例及 对照共457对，用Taqman探针法检测脂联素基因多态性位点基因型，运用t检验、方差分析、卡 方检验、多因素logistic回归分析脂联素基因多态性与缺血性脑卒中的关联。结果：脂联素基因两多 脂联素基因位点rS266729其等位基因CG突变与汉族人群缺血性脑卒中易感性存在显著负相关 忙O．04)：但把单因素分析时有所有存在显著差异变量纳入多因素logistic回归分析模型后 态性与缺血性脑卒中遗传易感性存在显著关联，但其突变不是缺血性脑卒中独立保护性因素。 关键词缺血性脑卒中；脂联素基因：基因多态性：病例对照研究 脂联素是调节机体糖脂代谢的重要生物活性肽，相关研究发现一定条件下脂联素影响炎症因子 的释放与趋化作用。迄今大量研究结论证明，脂联素是影响机体肥胖及发生2型糖尿病的重要因素， 脂联素水平的改变影响胰岛素的分泌与释放。糖脂代谢紊乱及炎症反应是引起动脉粥样硬化的高危 因素，进而影响心脑血管疾病的发生。脂联素基因的突变是引起脂联素水平改变的重要原因，国内 1391GA等与2 外大量研究发现其基因多态性如：．11377CG、．3971A／G、+45TG、+276G／T、．1 型糖尿病易感性相关fl～1。StamatisP【4J等对脑卒中患者进行调查发现脂联素水平与度过危险期后的五 年存活率相关；Hillary 的易感性相关，这提示脂联素基因多态性与缺血性脑卒中存在关联。故本研究采用Taqman探针荧 光定量PCR技术对中国南方地区汉族人群其脂联素基因2位点多态性与缺血性脑卒中易感性的关系 进行初步探讨。 1材料与方法 住院的35岁到75岁的汉族缺血性脑卒中首发病人，其诊断由两位及以上有丰富临床经验的神经内 科医师根据临床神经功能缺损症状和头部CT(MRI)检查并参照中华神经科学会第四届全国脑血管学 术会议修订的《各类脑血管疾病诊断要点(1995)》进行确诊【6】；在所选的病例中已排除肿瘤、血液 病、瓣膜性心脏病，房颤，脑血管畸形或动脉瘤、自身免疫性疾病等引起的继发性脑卒中患者。对照则 为与病例来自相同地区，并与病例同性别、同种族及年龄相近(相差小于5岁)的体检健康者，并 没有脑血管疾病患病史。每个研究对象在空腹8．12小时后分别用EDTA．K2抗凝管抽取静脉血5ml， 用于提取DNA、RNA及分离血浆并保存于．80℃冰箱以备用。 1．2探针及引物设计本研究的两位点的TaqMan引物及探针由上海超世生物技术有限公司合成和校 验。具体设计及信息见表】．1． 表1-1所研究位点引物和探针 Rs号 引物序列 探针序列 AG-t rs224i766 正s．CTGTTGCTGGGAGCTGTTCTAC-3 rs224l 反S．GGCCCTTGAGTCGTGGTTT-3 766 rs266729正，．TCATCAGAATGTGTGGCTTGC-3／ AG-g 19 第三届晋冀鲁豫流行病学学术会议暨2010流行病学郑州论坛 rs266729反，．TTGGACTTTCTTGGCACGCT-3l 按上海超世生物技术有限公司技术人员推荐的标准反应体系，计算所需Premix，上，下游引物、探 针体积量。10pl反应体系如下： 2x Premix 5．0pl 201．tmolfl上游引物 O．3pl