好氧反硝化菌的分离和固定化脱氮技术研究.pdfVIP

好氧反硝化菌的分离与固定化脱氮 技术研究 王攀刘建杨俊忠袁永泽熊丽刘德立’ (华中师范大学生命科学学院湖北省遗传调控与整合牛物学重点实验室湖北武汉430079) 摘要：利用富集培养分别从某纺织厂废水处理池和养鱼池塘中分离得到多株好氧反硝化菌株，并对 h 其反硝化能力进行了研究。结果表明：在特定的培养基中，在好氧条件下，菌株Hs-N2和Hs-N25在24 内对硝酸盐氮的去除率分别达到95％和l∞％；菌株Hs-N62在12h内对硝酸盐氮的去除率可达96％，而 且没有亚硝酸盐氮的积累。本研究通过分子水平鉴定及系统发育分析，并结合生理生化鉴定结果初步鉴定 菌株Hs．N2为沙门氏菌属(妇蛔D船，f口)，菌株为HS．N25为蜡状芽孢杆菌(砌c讲螂卯惮淞)，菌株HS-N62 为假单胞菌属(nP“如坍D，娜sp．)。通过对传统的聚乙烯醇．硼酸固定化方法优化改进，采用聚乙烯醇(P、，A) 和海藻酸钠(sA)混合作包埋剂，添加si02和caC03粉末增强小球颗粒的强度，并将菌体与粉末活性炭 充分吸附后包埋固定制成小球。该方法制备PvA小球明显提高了固定化球的传质性能和通透性，硝酸盐氮 的去除能力增强，并能重复使用。 关键词：好氧反硝化；废水处理；固定化 随着水体富营养化的日益严重，高效去除水中的氮素污染已成为当今水污染防治领域的 一个热点问题。我国水产养殖业迅猛发展，但在水产养殖过程中的氨、硝酸盐、亚硝酸盐、 磷酸盐等营养元素含量过高所造成的富营养化现象严重，结果造成大量鱼虾死亡，最终导致 重大经济损失，因此，控制水体中的硝态氮和亚硝态氮成为规模化养殖成功的关键之一。水 体中存在的硝酸盐氮，主要来源于生活污水，农jIk废弃物和某些工业废水。因此，去除水中 的硝酸盐氮对改善水质具有重要意义。 污水脱氮处理有物理、化学和生物方法，由于生物脱氮更有效，而且相对价格低廉，已 被广泛采用【¨。近年来，同时硝化和反硝化、反硝化除磷、短程硝化和反硝化脱氮工艺、厌 氧氨氧化工艺等的发现和研究，为解决污水处理问题提供了有效的途径。反硝化是将硝酸盐 或亚硝酸盐还原成N20或N2的过程【21。特别是好氧反硝化菌的发现，突破了传统理论的认 识，为生物脱氮技术提供了一条全新的途径，有力的补充了传统生物脱氮理论。应用固定化 反硝化菌处理水中的硝酸盐氮是一项新兴技术，也是目前国内外研究的热点。与传统的悬浮 生物处理法相比，处理效率高，微生物在反应过程中不会流失，而且可用简单方法回收再用。 聚乙烯醇凝胶强度较高，价格低廉，生物毒性小，被认为是目前较为理想的固定化载体【3J。 本文通过对聚乙烯醇．硼酸固定法的改进，固定化好氧反硝化菌并用于硝酸盐氮的去除，取 得了良好效果。 l材料与方法 7_AA201C50．2口07黼1Q6) 北省科技攻关计划项目(№．200 ‘通讯作者：1纠：8昏27囡：ddⅢu2002《阿ah00．∞m．∞ 152 1．1培养基 0．19， 富集培养基(SM，g／L)：NaN03O．85，丁二酸钠2．84，删zP041．36，1．gs04-7ltz0 7．O～7．4。 2_l微量元素溶液，DH K陴仉1．5，MgS04·7№00．10，2m1微量元素溶液，pH7．O～7．4。微量元素(g／L)：CuS04·5H20 4．0，FeS0．·71120O．70，Fecl。·6H207．O，Cocls·6地O0．20，Na啪4·2H203．40，Cacl：·2如0 7．0[4]。 2．0，pH BTB培养基(g／L)：丁二酸钠4．72，№N030．85，K地P041．0，FeS仅·7H200．2，MgS04·7比O 7．0 0．1，琼脂15，pHH1。 1．2富集培养和菌种分离 mL 将1mL采集的样品加入装有100SM的500mL锥形瓶中，30℃静置培养3—4天， 待培养基浑浊；取10mL菌悬液于