异体肌腱移植基础研究和临床应用的现状和问题.pdfVIP

201 1第八届北京骨科年会 异体肌腱移植基础研究与临床应用的现状与问题 胡琪张友乐 朱伟王澍寰孙燕琨刘波 北京积水潭医院 肌腱与韧带损伤是骨科常见损伤之一，肌腱与韧带缺损约占肌腱与韧带损伤的1／3。肌腱与韧 带缺损临床治疗主要是采用肌腱移植。自体肌腱移植方法尚不能满足临床需要，尤其是一些特定部 位的肌腱和韧带缺损的治疗，自体无法提供与之相匹配的肌腱作为供体。尽管人工肌腱的开发和组 织工程肌腱的研制应用有一定的进展，但真正应用到临床上尚存在较多问题。自上世纪后期，同种 异体肌腱移植的相关基础和临床研究逐渐被人们重视，并取得了可喜的临床疗效。目前，异体肌腱 移植广泛应用于临床肌腱、韧带重建的工作之中。现将我们的经验加以总结，结合相关资料综合评 估异体肌腱移植的效果及相关问题 一、异体肌腱移植的简史 1959年Peacock进行了首例新鲜异体指屈肌腱移植。他认为异体肌腱主要是胶原结构移植，没 有考虑以植物的细胞成分，结果产生了炎性反应和排异反应。1960年J．E．Flynn等进行了狗异体肌 Klein等进行了大鼠跟腱移植研究，大鼠跟腱经低温冷冻处理，这些动物实验均取得了满 年Leroy 意的实验结果。1967年Peacock等再次报道12例临床异体肌腱移植，取得70％的成功率。 组织相容性抗原(HLA)并非来源于占肌腱绝大部分的胶原组织，而是来源于少量的腱细胞，HLA 抗原性相对较弱，经过冻融或多聚甲醛处理后可明显降低，而对于X-线照射、戊二醛和丝裂霉素C 不能降低其抗原性。 国内方面，关于同种异体肌腱基础研究和临床应用开始于上世纪80年代后期。北京积水潭医 院手外科张友乐、杨克非教授等先后进行了深低温冷冻和冷冻干燥方法处理后的同种异体肌腱移植 方面的基础动物实验研究，并应用于临床病例，取得了良好的实验结果和临床疗效。张友乐和高新 生还首次建立国内深低温冷冻和冷冻干燥同种异体肌腱肌腱库。1996年胡必寺、顾玉东等也进行 了鞘管内异体肌腱移植的研究。近10余年来，大量文献报道了关于异体肌腱应用的实验基础研究 和临床应用，取得了异体肌腱移植的实验理论依据和良好的临床疗效。 二、异体肌腱移植的基础研究 1．异体肌腱的处理： 异体肌腱的处理主要解决两方面的问题：降低组织的抗原性，提高移植肌腱的细胞活性；控制 细菌和病毒感染。 (1)控制细菌和病毒感染主要通过对供体来源的控制，选择健康的供体；保证异体肌腱的取 材、处理、保存、运输和使用的无菌操作；移植前用抗生素盐水浸泡30分钟。 (2)控制异体肌腱移植的排斥反应，应通过移植前对异体肌腱的特殊处理，降低异体肌腱的 抗原性。目前用于降低异体肌腱抗原性的方法有：深低温冷冻新鲜异体肌腱；深低温冷冻干燥异体 肌腱：无水酒精浸泡异体肌腱；三氯甲烷／甲醇浸泡异体肌腱；脱氧鸟苷酸培养液浸泡异体肌腱等 等。我们推崇深低温冷冻方法处理异体肌腱。具体方法是：肌腱经生理盐水漂洗后，浸泡在MEM ·261· 201 1第八届北京骨科年会 液或1640营养液中10～15分钟，至于无菌容器中密闭封存。置于可控深低温冰箱内，逐步降温至 摄氏零下80度，或逐步降温至摄氏零下196度。10天后可作移植使用。也可再置于零下45度／105Pa 的真空冷冻干燥机内进行干燥处理，24小时后保留5％水分的肌腱密封保存待使用。孙燕琨、张友 乐(2006)通过比较普通深低温冷冻法和程序性控制降温深低温冷冻法对肌腱细胞活性的影响，得 出结论：经过深低温冷冻方法处理的肌腱内仍存在具有活性的肌腱细胞，但活性细胞的数量显著少 于新鲜肌腱细胞中的活性细胞的数量。应用计算机控制程序慢速降低温度方法处理的肌腱其活细胞 的数量有所提高，但仍少于新鲜肌腱细胞中的活性细胞数量。目前试验数据显示：冷冻降温速率2 度／分钟，降至4摄氏度后，维持20分钟；再继续以上述速率降温，降至零下40度时，在维持20 分钟，转入零下80度低温冰箱保存。复温速率与降温速率相同。 (3)实验研究证实：在新鲜肌腱低温冷冻过程中使用低温防护剂，可提高移植