小鼠Egr1基因启动子的克隆和其辐射诱导基因表达.pdfVIP

《中国癌症杂志》 年第 卷第 期 ’’’ %’ . #! 3EA* FA3F+F5] ’’’ ^B6 T %’ AB T. 小鼠!#$% 基因启动子的克隆 及其辐射诱导基因表达 ! % 魏道严，陈诗书 ，王中和 % （上海第二医科大学生物化学教研室，人类基因治疗研究中心，上海’’’(；上海第二医科大学附属第九人民医院，上海’’’%%） 【摘要】 目的：研究克隆小鼠!#$% 基因启动子及其辐射诱导基因表达特性。方法：用合成的一对引物，以 小鼠基因组为模板，扩增出 大小含 个 （ ） 基序的序列，通过亚克隆技术分别将其插入 )*+), - ../ 01 2 33 *, 4 2 55 1)6789-#:1; 测序载体和15=$?2(4 报告载体中。利用测序载体对克隆的@A* 序列进行分析，报告质粒载体经 ! +:1BC8-4*DEA! 脂质体介导转染3F?$G 细胞后给予 射线照射或 F 处理，用流式细胞仪观察5= 表达阳性细胞 数。结果： 扩增的 片段经测序证实与文献报道完全一致，报告质粒转细胞实验结果提示，照射或 处 3H @A* F 理可经 基因启动子而诱导 （绿色荧光蛋白）的表达。结论：成功地克隆了 基因启动子，经照射能诱 !#$% 5= !#$% 导报告基因5= 的表达，为今后的进一步深入研究奠定了基础。 【关键词】 启动子； !#$% 基因； 辐射诱导； 基因表达 中图分类号 J 文献标识码： 文章编号： （ ） HGI$I2 * %’’G$I2I/ ’’’ ’.$’I2$’. !#$%$ ’() *+#,#’)+ #- ,#./) 0+12 )$) 3$4 %’/ +34%3’%#$ %$4.5%6%%’7 #- )$) )8*+)//%#$ !# $%’ (%)* +,- ./’012* !3-4 51)6’17 8 $79%:;7); = /?17/0;:( * .1%)61%/ .7?)@ A7@/?%B C)/D7:0/;( * .1%)61%/ EFFFEG * +1/)%H 【 】 9