纤维蛋白、带红细胞血清干扰艾滋病毒抗体酶联免疫法测定实验性分析.pdfVIP

第五届中国病毒性肝炎与艾滋病实验室诊断与临床高峰论坛 纤维蛋白、带红细胞血清干扰艾滋病毒抗体酶联 免疫法测定的实验性分析 戚子惠 陈瑞林 张达衡 周华胜 刘发河 作者单位：525000 茂名市人民医院检验科 通信作者：戚子惠，电子信箱：qzh966@163.com 纤维蛋白、红细胞是干扰艾滋病毒抗体酶联 min ，抗凝管以2000 r/min 离心 5 min，分离血浆； 免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent 分离胶管以 2000 r/min 离心 10 min，分离血清； assay，ELISA ）测定常见的随机因素，严重影响 无分离胶管以 2000 r/min 离心 10 min 后，用加 测定结果，排除有一定困难，较少见报道。本研 样枪头轻混血块得混红细胞血清。 究对 HIV 抗体 ELISA 干扰性因素进行探讨，然 4 ．HIV 抗体-ELISA 常规法检测（下称常规 后将其排除简易化、文件化，方便基层等应用酶 法）：将 HIV 抗体-ELISA 试剂盒从冰箱取出， 联免疫技术进行艾滋病毒抗体筛查，为预防艾滋 放置室温下平衡 1 h，用双蒸馏水稀释浓缩洗涤 病服务。 液，测定孔设置空白、阴性、阳性、质控孔各 2 个，正常对照组血清与研究组的血浆、混红细胞 对象与方法 血清、分离胶分离血清进行配对检测，空白孔加 1．对象：正常对照组：随机采集体格检查 稀释洗涤液 50μl，检测孔加阴性、阳性血清及指 正常，HIV 抗体 （- ），心、 肺、肝、肾、止凝 定样本 50μl，混匀，置 37℃恒温箱温育 60 min， 血无异常及无其他合并症者 540 例，男 300 例， 然后洗板机洗板 5 次（每次浸泡时间 30 s ），反 女 240 例，年龄介于 15～55 岁之间；研究组： 应板拍干；除空白孔外，所有孔加酶标记物液 随机采集我院2009 年 9 月至2011 年 9 月院校学 50 μl （或1 滴），混匀，置 37 ℃恒温箱温育 30 生及进行健康体检的志愿者 1800 例，男 1300 min ，洗板机洗板 5 次（每次浸泡时间 30 s ），反 例，女 500 例，年龄介于 10～78 岁之间，心、肺、 应板拍干，每孔加 A 、B 底物液各 1 滴，混匀， 肝、肾功能大致正常及止凝血功能正常。 置 37 ℃温育20 min ，每孔加终止液 50μl 或 1 滴 2 ．仪器与试剂：酶标仪、洗板机为上海生 （2 mol/L H SO ），即进行酶标仪读板。 2 4 产 ， 型 号 分 别 为 Multiskan MK3 和 5 ．HIV 抗体 ELISA 改良法检测（下称改 Wellwash4MK2 ，离心机为北京离心机厂生产的 良法）：将HIV 抗体 ELISA 试剂盒从冰箱取出， LG2.4 型，HIV 抗体-ELISA 试剂盒由上海科华 放置室温下平衡 1 h，用双蒸馏水稀释浓缩洗涤 生物公司提供。 液，测定孔设置空白、阴性、阳性、质控孔各 2 3 ．样本采集与分离：（1）正常对照组用一 个，正常对照组血清与研究组的血浆、混红细胞 次性无菌采血针采静脉血 3 ml 于真空无分离胶 血清、分离胶分离血清进行配对检测，空白孔加 促凝管中，置室温 6 min，按离心孵育循环法[1]