库仑滴定法测定大鼠与人血清中胆固醇的含量.pdfVIP

电分析化学进展，1999 E18 库仑滴定法测定大鼠和人血清中胆固醇的含量 文志明刘爱茹徐礼棠 (中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所北京100050) 胆固醇是一种动物性甾醇，是体内一些重要激素的主要合成原料。胆固醇台量异常增高是 促发冠心病和动脉粥样硬化的主要危险因子之一【I]。胆固醇的测定方法有比色法、薄层色谱 法、气相色谱法、气相色谱一质谱法和高效液相色谱法等o“】。库仑滴定法为电解分析法，属于 一种绝对分析方法。根据胆同醇结构中含有双键的特点，本文采用库仑滴定法建立了血清中胆 同醇含量的测定方法，方法简便、侠速、准确，具有一定的实用性。 实验方法 1．库仑漓定在H型电解池的阳极区注入8～10“电解液，在阴极区加同～电解液至两 边液面相等，选择适当的电解电流(1mA)，先进行预电解(即空白滴定)，然后在阳极区注入适 量的样品溶液进行电解，达终点的同时，记录电解时间，并由下式计算胆固醇的含量t ． W—i×t×M／n×F 2．样品测定准确吸收血清o．20mI，放于5ml具塞磨口离心管底部，对准血清迅速加入 10min，准确吸收一定体积的上层清液进行库仑滴定，并计算血清中胆固醇的含量。 电解液的选择试用了不同电解液，结果以1rn01．I。。LKBr一冰醋酸(1·3，v／v)效果最 佳。 沮度的影响取一定量的胆固醇乙醇溶液，在不同温度下进行库仑浦定，结果表明在16 ～30℃范国内，温度的改变对测定无明显影响。实验时均在室温下进行库仑漓定。 指示终点的确定取一定量的胆固醇乙醇溶液，先用不同指示终点进行库仑滴定，结果表 明终点指针移动30pA时，可得到准确且稳定的结果。 反应电子数的测定取一定量的胆固醇乙醇溶液，按实验方法进行库仑滴定，以永停法指 示终点，测得n均值为1．98。 精密度与回收率取含o．351mg胆固醇的乙醇溶液进行多次重复测定，测褥其电解时间 行加标回收试验，当胆固醇的加入量为o．115～O．459mg时，其回收率范围为93．9％～105％， 平均回收率为100．3％。 样品测定结果 1．大鼠血清胆固醇古量的测定按实验方法对3种高脂血症大鼠血清样品中胆固醇的 古量进行了测定，结果见表l。 2．人血清阻固醇含量的测定按实验方法对8种人血清样品中胆固醇的含量进行测定， 结果见表2。 ·326· 电分析化学进展·1999 表1大鼠血清中胆固醇吉量测定结果(n一4) 表2人血渍中胆匾醇含量潞定结果“一s) 雨丽污_i酾蔽藻—丽万——丽f ) (mmd．L 1)(“)(mm01．I，1) 1 4．04 1．30 4．07 2 5．17 O。46 4．87 3 5．36 O．56 5．10 4 5．42 1．38 5．2l 5 5．92 0．73 6．37 6 6．92 O．89 7．04 7 7，88 】．04 8．36 § lQ：§ Q：§! !：盟 结论以库仑滴定法