利用中药材化学成分HPLC三维指纹图库指导中药质控方法忧化.pdfVIP

LC．166 利用中药材化学成分HPLC三维指纹图库 指导中药质控方法优化 梁贵键朱莉 郝 勇 李国辉 吕娟丽 胡永礼吕 冬 (空军总医院北京100036) (北京岛津分析中心北京 100029) 1 前言 由于中药品种繁多，化学成分多样，加上中医强调整体上辨证施治，所以中药传统用 法是复方药，这就决定了对中药成分的测定是一项复杂而艰难的工作。就中药化学成分检 测方法而言，多采用色谱的方法。80年代中期以前。主要以薄层色谱法(TLc)和气相色 谱法(Gc)为主。但受TLc分离效率较低和Gc适用对象有限的制约，目前以高效液相色 谱法(HPLc)作为最常用的分离制备和定性定量的手段。本文在已建立200多种西药化学 组分HPLc数据库的基础上，对近40个中药有效成分和约80种中药材进行了探索性的 系统测试，初步建立了中药有效成分和中药材化学成分HPLc三维指纹图和色谱行为数 据库，在指导中药质控优化上做了验证性的应用，取得了较好的预期效果。 2仪器与材料 ’ Lc—lOA．PDA HPLC仪。CLASs．M10A色谱工作站，sllima．packcLDODS和u． Bond印a1【c。。等6种色谱柱。中药对照品购自中国药品生物制品检定所，中药样品为售品。 3方法与结果 中药材化学成分HPLc指纹图库是基于各药材的水、60％与95％乙醇提取液等3种样 品。根据预试验结果和药物色谱行为数据库的指导，制定适当的系列流动相分别对各中药 进行测试，在微机上建立中药材HPLC．PDA色谱图象图库(见图l，2)和有效成分色谱图(见 图3)。 图1当归(a)和补骨酯(b)醇提液HPLc三维指纹围 4讨论 4．1 建立指纹库的必要性 用表格、曲线、图形等系统地反映中药化学成分间保留值对流动相呈现的多层面变化 趋势的文献较少，国内的外有关专著也只是分散在文献的汇编中。由于各文献间的色谱条 件各异，且不同品牌色谱柱的保留能力不同造成同一药物保留值不一，决定了文献间数据 的可比性差，给文献的整理带来诸多不便。系统测试中药HPLc三维指纹库并依靠计算 机信息处理技术是十分必要的，是色谱条件快速优化的基础。 ．366- 4．2建立指纹库的可行性 PDA检测技术提供的三维图可较好地解决不同流动相下带来不同变化的色谱峰的归 属问题。初步建立了描述药物保留特征的色谱代码体系，这有利于认识和解决色谱重复性 欠佳的问题。药物色谱行为的分类和数据库的建立可从宏观上把握药物的色谱行为趋势， 减少不必要的实验因素和次数。为今后利用网络向国内外药物分析者提供药物色谱行为资 源共享服务创造了条件。 43指纹图库的规律与应用 除去紫外无吸收及水溶性较大的多糖等极性成分外，总体而言。乙醇提取液成分较多， 水提取液成分较少，尤其是许多脂溶性成分含量甚低。这种在计算机上建立的中药材化学 成分HPLc三维指纹图库，同时具有多色谱和光谱信息，对指导中药材及其中成药的提 取、分离和定量具有重要价值。内标物的选择可根据200多种药物色谱行为数据库的查询 优化而来，实现了内标的整体优选，改变了以往内标选择的离散摸索。如传统名药六味地 黄丸由熟地黄、山茱萸、牡丹皮、山药、茯苓、泽泻等6种中药材加蜜制成，根据这6种 中药材的系列HPLc图，可预先确定出测定芍药甙、丹皮酚、熊果酸及没食子酸等成分 的提取、分离及定量的最佳条件。 ．d… 。●一●● 蹇：蚤 图2丹皮(c)和六昧地黄丸(d)中丹皮酚三维囤与等高缝围 ．～刖。 ■■●nii! k～ ^i二iij一 U～ ”『 逃 图3 23种中药化学成分HPLc囤 …一 川一M一 峰序依次为：没食子酸、天麻素、原儿茶酸、岩白菜素、咖啡酸、绿原酸、秦皮甲素、秦皮乙鬃、麻黄