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棉花论文:陆地棉叶片早衰的比较蛋白质组学研究
【中文摘要】棉花叶片的早衰直接导致棉株的早衰,而棉花早衰必然伴随棉花纤维强度降低、纤维整齐度下降、纤维长度变短,从而导致纤维的成纱质量降低。因此,研究棉花叶片早衰机制,对提高棉花产量、改善棉花纤维品质具有重要的意义。目前,棉花叶片早衰的功能基因组学研究已经取得了一定的进展,然而蛋白质组学研究仍处于起步阶段。本研究利用双向电泳结合质谱鉴定的蛋白组学方法,对两个棉花材料进行比较分析。提取早衰材料中棉所10号和不早衰材料中棉所16号叶片的蛋白质样品,利用双向电泳技术对总蛋白进行分离、考马斯亮蓝染色、扫描得到双向电泳图谱、利用软件ImageMaster 2D Platinum 7.0分析差异蛋白、对选取的差异蛋白点进行MALDI-TOF-TOF质谱鉴定。实验过程中,利用改良的考马斯亮蓝CBR250染色技术对聚丙烯酰胺凝胶染色,得到的图谱清晰、背景较低并且检测到较多的蛋白质点,效果比较理想。成功鉴定了92个差异蛋白点,其中40个在早衰材料中棉所10号中下调表达,52个上调表达。对得到的蛋白质进行功能分类:参与碳水化合物运输和代谢占全部鉴定蛋白的47.44%;参与蛋白质的翻译后修饰、蛋白质折叠以及分子伴侣蛋白质占全部鉴定蛋白...
【英文摘要】Cotton is one of the most importance ecnomomic crops and it is strategic goods which have a close relationship with our country’s economy and people’s life. However, our country has so much people while only has limited land, the contradictory between cotton and grains is very severe. An effective method to solve this problem is to promot the short-seasoned cotton. But short-seasoned cotton always has the problem of early-senescence which has negative influence on the cotton yield、fiber length、fiber strengt...
【关键词】棉花 叶片早衰 双向电泳 蛋白质组学
【英文关键词】cotton leaves senescence 2-D proteomics
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【目录】陆地棉叶片早衰的比较蛋白质组学研究
摘要
6-7
Abstract
7
第一章 引言
11-18
1.1 蛋白质组学的概念
11-12
1.2 蛋白质组学研究技术
12-15
1.2.1 蛋白质样品的制备
12-13
1.2.2 蛋白质的分离
13-14
1.2.3 蛋白质鉴定技术
14
1.2.4 定量蛋白质组学
14-15
1.3 生物信息学技术的应用
15
1.4 蛋白质组学技术的应用前景与展望
15-16
1.5 棉花早衰问题研究的意义
16-18
第二章 陆地棉叶片衰老的蛋白质组学研究
18-45
2.1 材料与方法
18-26
2.1.1 植物材料
18
2.1.2 主要试剂和实验仪器
18-19
2.1.3 棉花叶片蛋白质组提取
19-20
2.1.4 蛋白质双向凝胶电泳
20-23
2.1.6 蛋白质的胶内酶解
23-24
2.1.7 MALDI-TOF-MS 质谱鉴定
24-25
2.1.8 棉花叶片RNA 的提取
25-26
2.1.9 RT-PCR
26
2.1.10 叶绿素含量测定
26
2.2 结果
26-41
2.2.1 棉花叶片叶绿素含量
26-27
2.2.2 棉花叶片蛋白质的双向凝胶电泳结果
27-33
2.2.3 棉花叶片衰老过程中的差异蛋白鉴定
33
2.2.4 二级质谱鉴定
33-38
2.2.5 生物信息学分析
38
2.2.6 基因水平分析研究
38-41
2.3 讨论
41-45
第三章 全文结论
45-46
参考文献
46-53
附录
53-56
致谢
56-57
作者简历
57
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