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高效发酵混合糖产乙醇树干毕赤酵母的选育.pdf
第32卷第1期 吉 林 化 工 学 院 学 报 V01．32No．1
0F INSTITUTE0FCHEMICAL7IECHNOLOGY 2015
2015年1月 JOURNALJILIN Jan．
文章编号：1007-2853(2015)01_0001—04
高效发酵混合糖产乙醇树干毕赤酵母的选育
李力群，王丹
(吉林化工学院生物与食品工程学院，吉林吉林132022)
摘要：使用紫外诱变和梯级驯化法进行了菌种选育实验研究，获得一株优良菌株L．1．通过4因素3水平
mL／
正交实验优化了发酵条件．菌株L一1发酵混合糖(葡萄糖和木糖)经过65．0h，28．0℃，144rpm，140
500
mL瓶装量的发酵，乙醇浓度达到7．97％(v／v)，发酵乙醇能力比出发菌株提高了884％，残余葡萄糖
和木糖为0．70％，发酵乙醇效率为理论值的88．1％．
关键词：树干毕赤酵母；菌种选育；梯级驯化；乙醇发酵
78．4l ki．cfl22一1249．2015．01．00l
中图分类号：Q 文献标志码：A DOI：10．16039／j．cn
J．
以玉米秸秆为原料生产乙醇，其巨大的经济 用菲林试剂法测定还原糖浓度H
效益和社会效益可以预期，符合我国国情发展需 1．2实验过程
要．使用生物质工业化生产乙醇的研究还面临一 1．2．1 出发菌种
些瓶颈问题，其中，选育出对于高混合糖浓度、高 树干毕赤酵母(Pichiastipiti)CICC1960，购
酒精度和原料抑制物有较强适应能力的生产菌 于中国工业微生物菌种保藏中心．
种，是一类非常重要的课题¨…． 1．2．2紫外照射和TTC法筛选
稀释菌液用15W紫外灯照射，波长260nm，
1 实验部分 距离30．0cm，分别照射40s、50s和60s．平板培
养出菌落后使用TTC法筛选出深红色菌落，并测
1．1试剂与仪器 试其发酵能力．
主要培养基(自然pH值)：制备后于121℃， 发酵培养液组成(∥L)：葡萄糖30．0，木糖20．0，
30．0
min灭菌后使用． 酵母粉20．0，硫酸铵10．0，KH2P042．00，MgS04
(1)原种cM0077的保藏培养基(5。Be’麦芽 mL／500
2．00．发酵三角瓶装量100 mL，用八层纱布
汁琼脂培养基) 封口，外包皮纸，绳扎紧．湿热灭菌．接种后在28．0℃
(2)，rrC(2，3，5．氯化三苯基四氮唑)”o下层
摇床内，144叩m发酵，其实验结果列于表1．
培养基(∥L)，木糖10．1，蛋白胨2．00，酵母膏
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