肝舒乐片对慢性非细菌性前列腺炎大鼠细胞因子TNF-α、IL-1β的影响.pdfVIP

二实验研究 肝舒乐片对慢性非细菌性前列腺炎大鼠细胞因子TNF．仅、IL．1p的影响 洪素兰1，汪金涛2李艳艳3 2．河南中医学院针灸推拿职业学院，河南洛阳4710233．河南中医学 (1．河南中医学院，河南郑州450008 院第三附属医院，河南郑州450008) 【摘要】目的：本研究通过观察肝舒乐片对慢性非细菌性前列腺炎(CNP)大鼠模型前列腺组织 细胞因子(IL．1B和TNF-a)及病理组织学的影响，探讨其对慢性非细菌性前列腺炎的作用．方法： 给成年清洁级雄性Wistar大鼠前列腺内注射25％消痔灵，建立慢性非细菌性前列腺炎动物模型． 造模后l周，随机选取造模后大鼠和正常组大鼠各2只，解剖后做病理显示造模成功．将动物 随机分为6组，每组10只，分别为肝舒乐组、前列康组、疏肝组、健脾组、模型组、正常组． 结果：肝舒乐片可降低前列腺组织匀浆内IL．1p，TNF．a含量；可减少炎细胞浸润，抑制纤维组 织增生，恢复前列腺分泌功能．结论：肝舒乐片对慢性非细菌性前列腺炎模型大鼠有较好的治 疗作用． 【关键词】肝舒乐片；慢性非细菌性前列腺炎；细胞因子；病理改变；实验研究 “肝舒乐片”以张仲景经方“四逆散”为基础。在30余年临床观察的基础上加味而成，经临床 应用观察，在治疗肝郁脾虚型慢性肝病、乳腺病、糖尿病已取得了很好疗效。本研究采用慢性 非细菌性前列腺炎大鼠模型，对模型大鼠前列腺组织匀浆中的细胞因子IL．1B，TNF-ot含量检测 对比，观察具有疏肝健脾、清热利湿、活血化瘀功效的肝舒乐片对模型大鼠细胞因子II广1B，TNF吨 含量的影响，探讨该药对慢性非细菌性前列腺炎的防治作用。 1材料与方法 1．1实验动物 年4月18日开晦嫩。 1．2药物及制备 肝舒乐片：由河南中医学院第三附属医院提供。主要成分：柴胡、炒枳实、白芍、白术、 炙甘草、鸡内金、生麦芽、虎杖等(批准文号：豫药制字。O．3克／片。疏肝方，由 肝舒乐片拆方所得的以疏肝为主要作用的药物组成：健脾方，由肝舒乐片拆方所得的以健脾为 主要作用的药物组成。 ．138．． 第三届中医方证基础研究与临床应用学术研讨会论文集 25％消痔灵注射液，吉林省集安益盛药业股份有限公司生产，批号：030719 号，O．5克／片。 实验用药剂量按人鼠体表面积比例(K)O．018换算【l】，相当于l临床成人每公斤体重(人的 体重按60公斤计算)用药量的10倍。将各组药物于每次使用时以片剂研末加蒸馏水和0．2％羟甲 基纤维素(CMC)助悬制成混悬液。 均加入0．2％CMC(羟甲基纤维素)助悬。 113试剂 大鼠TNF--a放射免疫试剂盒，北京普尔伟业生物科技有限公司；大鼠IL-Ip放射免疫试剂 盒，北京普尔伟业生物科技有限公司；低温切j=L石蜡(52℃—56℃)，郑卅I华美生1勿j勿恐洵，批导 3％戊巴比妥钠，1％o新洁尔灭液，10％甲醛，75％乙醇等均有郑州化学制药厂生产。 1．4模型的建立与给药 实验动物在充足的饲料和水的条件下饲养一周，称重。用3％的戊巴比妥按35mg／Kg比例， 作大鼠腹腔内消毒麻醉，接着下腹部消毒，正中取纵向切口，提起膀胱及两侧精囊腺，暴露前 列腺，实验组以25％消痔灵注射液0．2m1分别注射至前列腺侧叶(每单侧叶注射O．1m1)，正常 组分别注射等量生理盐水，缝合切口。术后连续3天，每只肌注青霉素4万单位。回笼饲养2 周即建立慢性非细菌性前列腺炎动物模型。选取造模成功的大鼠50只编号，随机分成5组，分 别为模型组、前列康组、肝舒乐组、疏肝组和健脾组各10只，合正常组10只，共6组60只。 各组大鼠于术后第7天开始给药。肝舒乐组、疏肝组、健脾组按10rnl·kgLd．1灌服中药混悬 馏水。连续给药4周。 1．5标本的制备与检测 连续给药4周，于末次给药后24小时，称大鼠体重，颈椎脱臼法处死，摘除前列腺。用电 子天平称取前列腺重量后，用无菌手术刀把大鼠前列腺分为两部分。其中右侧叶迅速放入10％ 中性福尔马林液，固定7天，逐级酒精脱水，二甲苯透明、浸腊、石蜡包埋，常规切片5um， 腿染色。左侧叶用冷生理盐水冲洗残留在小烧杯中的碎组织块并倒人匀浆器中，进行匀浆(其 中匀浆器下端浸人冰水中)。随后将组织匀浆以300